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2007-06-28 05:53
只有一句话，眼睛的灵敏度肯定不及X光胶片，所以看不见的不一定就没有发光，看不见的有可能是条带很细或者很弱，不明显，但是在胶片上可以反映，这至少你的背景很干净，但也可能是没有发光，也许是前面的步骤有问题。看见了如果是很亮的特异性条带则说明条带比较粗而且比较强，但也可能出现比较强的非特异性背景。
评价WB发光的指标主要包括发光强度和持久度，1.强而持久则是最好的现象；2.强但很短暂说明二抗浓度大，需要稀释；3.弱但是可以持续发光就可能是上样量的问题或者是蛋白本身丰都的问题，如果不发光则很可能是很多原因造成的。 鉴定发光试剂盒的标准步骤是混合ECL中的A、B液，然后加入1ul二抗，在暗室中观察如果发出蓝色的荧光则证明发光试剂盒和二抗均无问题。无需显影定影。 |
已解决
