求助稀释好的一抗和二抗一般最多能重复使用几次...

跟变黑没直接关系，主要是重复久了，抗体效价会下降，识别目的条带能力降低。

具体能重复几次，跟抗体本身，还有你自己的实验条件有很大关系。每个实验室都不一样的（重复三四次的我试过，但也有的使用过一次就不好用了）。

你自己动手摸索下就行了。

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janlont

跟变黑没直接关系，主要是重复久了，抗体效价会下降，识别目的条带能力降低。

具体能重复几次，跟抗体本身，还有你自己的实验条件有很大关系。每个实验室都不一样的（重复三四次的我试过，但也有的使用过一次就不好用了）。

你自己动手摸索下就行了。

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好的 谢谢

还有个问题想请教一下，封闭的原理究竟是什么？为什么要封闭？背景黑与封闭有关吗

一抗重复 看你上次效果。二抗每次新配。一抗重复多了 会有黑点，脏。 封闭就是对膜上没有蛋白的地方填满，防止抗体的非特异性结合。

real456

一抗重复 看你上次效果。二抗每次新配。一抗重复多了 会有黑点，脏。 封闭就是对膜上没有蛋白的地方填满，防止抗体的非特异性结合。

谢谢 二抗都至少重复用了5次