如何在抗体上标记荧光 透析方法...

如何在抗体上标记荧光 透析方法

透析标记法
此法适用于小量抗体的荧光素标记，标记简便，非特异性染色较少。
(1)试剂和材料 试剂和材料同改良法。
(2)方法及步骤
①用0．025mol／L碳酸盐缓冲液pH9．0，将欲标记免疫球蛋白稀释成1％浓度，装入透析袋中。
②用同一缓冲液将FITC配成0．1mg／ml的溶液，按10mg／ml球蛋白溶液体积的10倍，将FITC稀释液盛于圆柱形容器内，并使透析袋浸没于FITC液中。
③容器顶端盖紧，底部放搅拌棒，在4~C电磁搅拌下透析标记24h。取出透析袋中标记液，即刻用SephadexG50凝胶过滤，去除游离荧光素，分装，贮存于4℃中。