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免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-24 11:46
免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊
举报 2018-02-04 14:18
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西.一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。

如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以现在的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。
这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
举报 2018-02-04 22:46
底物——就是你要检测的东西
一抗——可以特异的结合到底物上的抗体,作用是中介,抓住底物,再招呼二抗过来
二抗——可以结合到一抗上,并带有可以被检测出的标记的抗体,作用是被检测出来,自己不能结合底物,却可以结合一抗,等一抗抓住底物了再上去结合一抗,通过检测二抗,就能找到底物了。

举例:你要检测A蛋白是否存在,先把一抗加上去,让一抗充分结合底物A蛋白后,洗掉没结合上的一抗,然后加上有荧光的二抗,二抗和已经结合了A蛋白的一抗再结合,洗掉没结合上的二抗,然后观察荧光显色,就知道A蛋白存在于什么部位了。

要点:一抗二抗都是一种可以特异结合别的东西的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)
举报 2018-02-06 08:37
一抗特异性结合组织中你要检测的物质,而二抗则能和一抗结合,并带有放射性、生物素或者地高辛标记,使得你可以观察到。
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