求细胞悬液的免疫荧光步骤...

求细胞悬液的免疫荧光步骤

1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭：37度，20分钟

7.一抗，4度过夜，一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净，3min*5次

9.二抗 37度小于一小时