|
举报
2018-02-02 21:38
PET-32a的His tag分别在前面的trx蛋白C端以及你的目标蛋白C端，如果你的目的蛋白在构建载体的时候自己加了终止子，那么你的目的蛋白C端是没有His tag的，也就是说唯一一个his tag在trx与你的蛋白之间（PET32a是融合蛋白），这样，PET-32a提供的两个肽链内切酶（凝血酶和肠激酶）都是可以切掉的，当然，个人建议你用肠激酶，因为肠激酶酶切位点更贴近你的目的蛋白，而用凝血酶的话还有一个S tag。如果你在构建载体的时候，下游引物没有加终止子，那么你的蛋白的N端也会有一个His Tag，这时候你需要用TAGZyme了，这个酶专一性去除his tag的。
|
|
举报
2018-01-27 09:57
用吹风机吹，然后轻轻的用之家扣掉~OK
|
已解决
