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2016-07-04 20:45
我用takara的rizol 提取的总rna为什么260/230一直很低,那些方面的问题呢??? 师兄姐们有没有遇到过同样的问题 |
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2016-07-06 01:49
xiaozhameng A 260 / A 280 的比值,是用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品其比值大于 1.8(DNA)或者 2.0(RNA)。如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在RNA、蛋白质或者酚类物质的影响。 A 230 表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等。OD260/230值低的原因就是核酸中存在污染物,很可能是你使用融解DNA的缓冲液有污染,或者是因为调零不准、比色皿没有洗干净等。 takara也有提RNA的试剂盒,用着还可以。可以不用trizol 来提取RNA 。 |
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2016-07-10 00:52
TRIzon( RNA提取试剂盒) 产品介绍 Engreen TRIzon是基于异硫氰酸胍/苯酚法的一种即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中,Engreen TRIzon可保持RNA完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物。加入氯仿后,溶液分为水相、中间层和有机相,RNA在水相中。取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白。应用范围 Engreen TRIzon抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。 主要特点 所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。 卓越的细胞溶解能力,轻松应对各类待提样品。 保持样品RNA的完整性,有效抑制RNA降解。 对动植物细胞或组织以及血清、病毒和细菌均适用 |