举报
2004-11-24 12:10
trizol提取步骤(异丙醇作沉淀剂)
1.取50-100mg新鲜植物叶片放入研钵中,加入液N2迅速研磨成白色细粉末; 2.将粉末转入盛有1mlTRIZOL的DEPC处理过的1.5ml的EP管中; 3.15-30℃温育5min,加入200ul氯仿,剧烈振荡15s,15-30℃温育2-3min; 4.4℃<12000离心15min; 5.将上清液转入新EP管中,加500ul异丙醇,15-30℃放置10min; 6.4℃小于12000g离心15min; 7.弃上清,加75%乙醇(>1ml)涡旋洗涤沉淀; 8.4℃小于7500g离心5min; 9.自然干燥(不要干燥透),枪头吹打溶于50-100ulRNase-free water(DEPC水反转录)或DEPC水或甲酰胺溶解(杂交); 10.-70℃保存。 |