【求助】PCR中的DNA聚合酶和载体的选择问题，希望大家帮忙...

【求助】PCR中的DNA聚合酶和载体的选择问题，希望大家帮忙

用Pfu高保真酶扩增！载体选择PcDNA3.1

谢谢，你的帮忙，我十分感谢，不过我稍微查了一下你说的载体，好像是5000多，我们老师不会给我买的，能给我推荐一个便宜一些的吗，300、500的，十分感谢，无限感激

希望大家帮忙啊！！！
我的平端载体应该选哪个啊

我们有top克隆平端载体，需要请联系我

如果有条件最好用 PrimeSTAR GXL
如果没有那个条件可以用Prime STAR HS
如果GC含量高可以用Prime STAR HS with GC buffer

Prime STAR HS with GC buffer

真的很好用吗，我正在考虑呢

如果从费用角度来考虑 LA taq with GC buffer 是非常好的。一般做5‘RACE我都用这个，LA Taq配GC buffer I 基本无敌，但是有的时候会有个别碱基错配。prime STAR的扩增效率能低一点，保真效果好，这个看实际情况决定。

谢谢楼上的朋友，我的基因要去测序，要有保真性，呵呵，我想问问这prime STAR对于引物有没有要求啊，要求引物磷酸化吗??

期待回来。。。。。。。。。。。。。。。。。。

引物没有特殊要求，一般的PCR级别引物就可以。以下是说明书：
http://www.takara.com.cn/explain/E/DR010A.pdf
http://www.takara.com.cn/explain/E/DR044A.pdf
需要注意的是这个酶是HS版本的，在PCR程序设定时最好在前面先加一步94度3分，这个说明书上没有提到，本人一般使用其中的2 step PCR反应条件。

楼上的jk_xdx
十分感谢你的提醒，要不然我要走很多的弯路呢，好人好梦呵呵