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收藏 | 举报 2014-07-11 03:05 关注：256 回答：33

【主题学习】CRISPR/Cas9 基因敲除技术...

已解决

悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-12 08:51

【主题学习】CRISPR/Cas9 基因敲除技术

举报 2014-07-21 07:27

小刀188
切断后，基因组启动自主修复机制，总会缺失或增添几个或几百个碱基，导致基因组发生移码突变，达到基因敲除的目的。

你好我想请教一下比如基因敲除小鼠小鼠体内不都有同源染色体么在没有外源同源模板情况下怎么能保证基因修复不会利用自身同源修复模板进行HDR修复呢？这样不就不能达到敲除目的了吗谢谢！

举报 2014-07-22 00:14

学习下，谢谢楼主的分享啊

瓜农	举报 2014-07-15 03:54 楼主在哪高就啊，有空私聊啊，我也是做crispr的，多多交流经验

举报 2014-07-12 11:57

敲除的，还是不太明白，求指教！

举报 2014-07-13 06:36

自由悠悠
敲除的，还是不太明白，求指教！

你敲的是什么细胞，人，小鼠，斑马鱼，植物（水稻，烟草）or细菌

举报 2014-07-15 01:34

楼主你好，下一步实验需要做肿瘤细胞内的目的基因的敲出，crispr/cas9方面看了几篇文献，但是整体思路以及载体构建方面不是太了解，求指教~~

举报 2014-07-15 20:18

留个联系方式，我给你发一些关于CRISPR/Cas9的资料

举报 2014-07-19 12:22

额，刚接触到这个领域，还处于入门阶段。。。

举报 2014-07-17 20:53

【实验流程】从gRNA设计→CRISPR载体构建→细胞转染→KO阳性克隆筛选，完整解决方案！

举报 2014-07-19 03:41

学习了

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