用cas9基因敲除不同转录本怎么设计grna...

用cas9基因敲除不同转录本怎么设计grna

这要具体分析，如果这个基因存在可变剪接，那就看这个基因是否有外显子（不为三的整倍数的外显子）是这些转录本里共有的，如果是就可以在这个外显子上设计sgRNA，这样就可以敲除掉这个外显子和其后的外显子（因为移码突变导致的提前翻译终止）。如果没有这样的外显子那就只能在不同的外显子上设计多条sgRNA，然后筛选这几个转录本都敲除成功的细胞系或实验动物就可以了（毕竟应用Cas9技术能够实现多基因敲除）。