收藏  |   举报 2017-10-03 02:49   关注:190   回答:1

不同转染试剂为什么会有强弱表达的差别...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-09-23 21:33
不同转染试剂为什么会有强弱表达的差别
举报 2017-10-06 09:29
不同的转染试剂有不同要求, 生物通小编个人经验是转染试剂细胞毒性高 的要求长满一些,细胞多一些,就算死伤惨重 也还能留下多些活口,嘿嘿,对于质粒转染来 说这并非评判转染试剂好坏的标准,毕竟只要 转进去就算OK 了,但是对于RNAi 实验来说 就不同了),将siRNA 和转染试剂混合物加 入共同温育一段时间,更换培养基,再培养 24-48 小时检测mRNA 含量等等。 创新的方法是反向转染。这种方法称为 everse tr ansfection 或者neofection,和传统 转染方法相比区别在于,传统方法需要提前一 天接种铺板,培养24 小时后等细胞到一定汇 合度再加转染复合物转染;而反向转染则是不 用预先接种细胞,先加入转染试剂和siRNA 混合物在培养板上共同温育,然后再加入细胞 铺板,培养。这个方法的好处不单是可以节约 一整天的时间,而且转染效率高。
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