有人用CRISPR/Cas9系统做细胞基因敲除吗交流下...

有人用CRISPR/Cas9系统做细胞基因敲除吗交流下

是的，确切来说是大量表达。 大肠杆菌是基因重组技术中常用的细菌，将外源目的基因(如人胰岛素基因)导入大肠杆菌后可在大肠杆菌内表达目的蛋白(如胰岛素)，由于细菌繁殖速度快，通过发酵便可在短时间内获得大量胰岛素，再经多步分离、纯化便得到了药用胰岛素。

OriGene公司最新推出基因组编辑工具“CRISPR/Cas9系统”，该系统灵活简单、可以对特定基因组位点进行切割置换的，特异性高、细胞毒性低。CRISPR/Cas9系统是利用Cas9核酸酶在向导RNA的指引下通过识别基因组的任何位点保守的间隔相邻基序（PAM，序列为NGG），在PAM的上游对DNA进行定点切割。 使用pCas-Guide系统可以很简便的为内源性基因标记标签。除此之外，pCas-Guide系统的供体载体（rescue donor vectors）也可以用于其他的基因组工程，如基因抑制（突变，缺失，插入），用于启动子研究的荧光素酶报告基因置换或绿色荧光蛋白基因置换，基因敲入以及用于治疗的基因修复等。