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贤的小石子儿 有引物二聚体,产物跑下胶就知道了
跑胶了呢,结果好像引物二聚体不是很明显,像这样的话需要换引物吗?谢谢您~
小新2018 跑胶了呢,结果好像引物二聚体不是很明显,像这样的话需要换引物吗?谢谢您~
贤的小石子儿 有两个方法,一是减少引物的量。二是换引物了
还想再请教您一个问题,当时因为时间紧张,没来得及直接做标准曲线,直接扩增了,后来师兄根据上机结果直接选了一个模板的稀释浓度,出来的结果是这样的,现在还需要再做一个标准曲线吗,这样出来的结果是不是不能去做△△T计算,谢谢您~
小新2018 还想再请教您一个问题,当时因为时间紧张,没来得及直接做标准曲线,直接扩增了,后来师兄根据上机结果直接选了一个模板的稀释浓度,出来的结果是这样的,现在还需要再做一个标准曲线吗,这样出来的结果是不是不能去做△△T计算,谢谢您~
贤的小石子儿 呵呵,太客气了,相互学习~你是做相对定量么?相对定量如果不是医学应该还好,是做医学相关的话那就最好严谨一点吧,这是我的个人看法。
还是很谢谢您的,是医学相关的,师兄说我的不需要做标准曲线看扩增效率,所以就没有做了
小新2018 还是很谢谢您的,是医学相关的,师兄说我的不需要做标准曲线看扩增效率,所以就没有做了
贤的小石子儿 我做相对定量的话,首先是看rna提取完整性,跑胶三条带,然后,是引物特异性,直接pcr扩增看效果,都可以就上机。
并且内参和目的基因的ct值有区间吗?现在出的结果内参16左右,一个目的基因ct值27左右,另外一个目的基因21左右,两个目的基因的表达是正相关的
贤的小石子儿 不能发私信了,我先休息了,明天再说吧。
好的,谢谢您!