收藏  |   举报 2017-05-01 20:44   关注:227   回答:4

定量pcr跑出了奇怪的结果,求大神指点...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-12 09:03
定量pcr跑出了奇怪的结果,求大神指点
举报 2017-05-05 19:45

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gezhigezhi
结果如图。A到E都是一个样本,A123是gapdh,后面共有18种引物。f到h是另一个样本,前三个是gapdh,后面是11种引物。结果是这样的没有起跳。。样本和引物之前做都没有问题。。做这次pcr,我只是在加样完毕到上机器之间有一个多小时在外面,前几十分钟在--20度冰箱。后20分钟在冷库解冻。放冷库的时候,用橡胶手套盖住遮光。不知道是不是这里出了问题。希望能有大神指点。
另外还有几个问题。就是跑出来的结果RFU居然有负值,这是怎么回事呢?几乎在0附近,但是在溶解曲线求导前的那个曲线。RFU又是从2400+开始下降的,这是为什么呢?


......


没一个扩增的。都是二聚体。
举报 2017-05-06 05:24
88675106qwe

没一个扩增的。都是二聚体。

请问你找到原因了吗我也遇到类似的问题
举报 2017-05-09 12:44

同问同问,我用的探针法,负值到了-2000,到底是什么原因啊,从来没遇见过负值

举报 2017-05-03 05:23
小夏子5

请问你找到原因了吗我也遇到类似的问题

没有找到原因,不过后来也没有再出现这种情况了。

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