|
举报
2007-06-02 07:54
做酵母双杂交吧,这个试剂盒还可以,但是应用的SMART技术虽然可以得到全长CDNA,缺点是缺乏大片断,在VIP数据库中有一篇文章,是使用一定的方法,改善SMART技术以提高大片断的含量,我试过觉得非常不错,你可以试一试,而且做SMART技术对于温度的准确性要求很高,一定要找一台号的PCR仪器,而且这个PCR中有一步骤是LD-PCR,有的PCR仪器可以直接设置每一次循环增加5分钟,有的却不可以
|
|
举报
2007-05-25 02:58
很感谢各位的指导，
我要构建的是植物CDNA噬菌体文库，而TAKARA的是质粒文库， 看过不少文献报道用得最多是SMART技术构库，但由于当前该技术涉及专利问题，全世界都停止销售。还有的是用Stratagene公司文库构建试剂盒，但贵得可怕，八折后也要1.8万，还不算MRNA纯化试剂， 我们实验室目前还没有人构过文库，我现在不知道是买试剂盒还是自己单买试剂做？老板说给我两万元，对一个硕士来说，已算多了。总RNA要先纯化才用于构库，mRNA纯化试剂盒我又该如何选择？ 我学的是发酵专业，但做的是分子生物学方面的东东，烦请各位战友给我指点一下...... 谢谢大家 |
|
举报
2007-05-23 07:45
我建的是昆虫触角的cDNA文库
用的是Clontech 的SMATR cDNA Library Construction试剂盒 货号 634903 另外再加上做LD-PCR的试剂盒 Advantage 2 PCR Kit 就行了 货号 639207 两个加起来我花了大概是不到8000块钱吧 |
|
举报
2007-05-26 23:53
另外，SMART建CDNA文库是可以直接用总RNA,不必纯化mRNA.
|
已解决
