细菌RNA试剂盒提完后有DNA污染，怎么去除...

细菌RNA试剂盒提完后有DNA污染，怎么去除

细菌RNA试剂盒提完后有DNA污染，去除DNA的方法：做普通pcr，看看条带对不对。DNase I 处理，酚氯仿抽，然后isopropanol沉淀，DEPC水溶。 不需专门灭火，因为在反转录前有一个步骤是加热变性。一般是75度5min 后面取不超过40%反转录体积的RNA用于反转录，但反转录前最好检测一下RNA质量，免得浪费反转录酶。
但是，这样做的前提的，RNA提得要好，浓度要高，这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的（DNAseI buffer含有）情况下，RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。