载体构建，菌落PCR酶切鉴定都正确，测序无目的片段...

我用了很多年的病毒载体，各种病毒也包过非常多，欢迎大家来我的病毒包装与质粒转染精华答疑贴答疑

贴子链接：腺相关病毒包装（AAV）、慢病毒包装、腺病毒包装、细胞转染、病毒在体转染【技术答疑】

如果你确认酶切没问题，换家测序公司测序

把转化后的全部质粒全都送去测序（先不验证）。因为测序结果是最有说服力的。筛选测序返回的结果，最后对序列正确的质粒做PCR及酶切验证。