收藏  |   举报 2016-07-06 15:11   关注:249   回答:20

蛋白超滤技术相关知识整理(个人整理,欢迎交流补充)...

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蛋白超滤技术相关知识整理(个人整理,欢迎交流补充)
举报 2016-07-16 07:30

我也是使用超滤膜分离纯化蛋白,使用的是图二的Amicon Ultra-15超滤离心管,感觉浓缩效果不错,确实也截留得到了目标蛋白,但如何清洗超滤膜一直很头疼,版主实际使用中是怎么清洗的呢

举报 2016-07-16 08:26

这种离心式的超滤管,我觉得最好不要长期或者交叉使用,吸附损失非常大,有时损失高达50%,平常的清洗就是使用完后依次使用2M NaCl、纯化水低速离心清洗,最后用20%乙醇注满保存。

举报 2016-07-07 22:22
silverqj1986

这种离心式的超滤管,我觉得最好不要长期或者交叉使用,吸附损失非常大,有时损失高达50%,平常的清洗就是使用完后依次使用2M NaCl、纯化水低速离心清洗,最后用20%乙醇注满保存。

老师,请问您知道Millipore spin filter吗?这个也是超滤离心管吗?

举报 2016-07-15 03:04
大三全人民

老师,请问您知道Millipore spin filter吗?这个也是超滤离心管吗?

你好,应该不是超滤离心管,密理博的超滤离心管系列是Amicom Ultra吧。你上官网看一下

举报 2016-07-14 11:11

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silverqj1986
大三全人民

老师,请问您知道Millipore spin filter吗?这个也是超滤离心管吗?

你好,应该不是超滤离心管,密理博的超滤离心管系列是Amicom Ultra吧。你上官网看一下

......

老师您好,我在官网查了一下,只查到了这个,不明白什么意思,好像不属于产品类??丁香通上有卖规格2ml的,但我不知道这个是什么?我的目的是沉淀蛋白质,目标蛋白分子量是1200,需要离心12000g。文献中是这样说的“

Supernatants were transferred tothe upper reservoir of millipore spin filter tubesand centrifuged for 5 min at 12,000 × g.”

我查了下Amicom Ultra的超滤离心管,好像离心力不能用很大,这个需要专门的离心装置吗?第一次接触色谱,所以很多东西需要学习。。还请老师包涵。


举报 2016-07-07 03:46

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silverqj1986
大三全人民

老师,请问您知道Millipore spin filter吗?这个也是超滤离心管吗?

你好,应该不是超滤离心管,密理博的超滤离心管系列是Amicom Ultra吧。你上官网看一下

......

老师您好,我在官网查了一下,只查到了这个,不明白什么意思,好像不属于产品类??丁香通上有卖规格2ml的,但我不知道这个是什么?我的目的是沉淀蛋白质,目标蛋白分子量是1200,需要离心12000g。文献中是这样说的“

Supernatants were transferred tothe upper reservoir of millipore spin filter tubesand centrifuged for 5 min at 12,000 × g.”

我查了下Amicom Ultra的超滤离心管,好像离心力不能用很大,这个需要专门的离心装置吗?第一次接触色谱,所以很多东西需要学习。。还请老师包涵。


举报 2016-07-12 20:08

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大三全人民
silverqj1986
大三全人民

老师,请问您知道Millipore spin filter吗?这个也是超滤离心管吗?

你好,应该不是超滤离心管,密理博的超滤离心管系列是Amicom Ultra吧。你上官网看一下

老师您好,我在官网查了一下,只查到了这个,不明白什么意思,好像不属于产品类??丁香通上有卖规格2ml的,但我不知道这个是什么?我的目的是沉淀蛋白质,目标蛋白分子量是1200,需要离心12000g。文献中是这样说的“

Supernatants were transferred tothe upper reservoir of millipore spin filter tubesand centrifuged for 5 min at 12,000 × g.”

我查了下Amicom Ultra的超滤离心管,好像离心力不能用很大,这个需要专门的离心装置吗?第一次接触色谱,所以很多东西需要学习。。还请老师包涵。


......

我是默克密理博的技术,你说的这个应该是密理博的超滤管,你选择超滤管的时候根据你的蛋白的分子量和溶液的体积进行选择。小体积的超滤管(0.5ml or 2ml)可以使用12000g的离心力进行操作

举报 2016-07-07 01:57

我想问您一下,使用该超滤离心管前,要不要用什么先清洗一下,还是直接加样品进行纯化。


举报 2016-07-09 12:38
昙惜

我想问您一下,使用该超滤离心管前,要不要用什么先清洗一下,还是直接加样品进行纯化

我一般使用超滤离心管之前会先用纯化水进行一下润洗和清洗,不建议直接加样品。

举报 2016-07-17 17:22

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大三全人民

老师您好,我在官网查了一下,只查到了这个,不明白什么意思,好像不属于产品类??丁香通上有卖规格2ml的,但我不知道这个是什么?我的目的是沉淀蛋白质,目标蛋白分子量是1200,需要离心12000g。文献中是这样说的“

Supernatants were transferred tothe upper reservoir of millipore spin filter tubesand centrifuged for 5 min at 12,000 × g.”

我查了下Amicom Ultra的超滤离心管,好像离心力不能用很大,这个需要专门的离心装置吗?第一次接触色谱,所以很多东西需要学习。。还请老师包涵。

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你的目的是沉淀蛋白质,为什么要用超滤离心管呢?你查到的这个东西应该是离心过滤器。超滤管的离心速度不能用到12000g的,会把超滤管甩裂开。不需要专门的离心装置,一般的低温离心机、转子配套即可。

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