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请问免疫组化如何正确选择和使用二抗...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-24 11:47
请问免疫组化如何正确选择和使用二抗
举报 2018-01-28 16:07
1 种属来源要匹配:根据所用一抗选定二抗。一般来说,如果一抗是小鼠源性,二抗应选择兔/山羊或其它种属抗小鼠的抗体。目前,美国Vector公司和 Zymed公司都有开发的用小鼠抗体检测小鼠组织的试剂盒,即一抗来源于小鼠,该试剂盒采用了通用非特异性封闭液和专利封闭内源性小鼠Ig的封闭液,可以 得到清晰的染色背景。
2.注意抗体同种型和亚型:确定一抗同种型和亚型后,可以选择抗一抗来源种属广谱Ig或针对一抗亚型的二抗。如一抗是小鼠IgG1,可以选用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。
3.正确使用:也需要重新选择稀释比例。一般供应商提供稀释比例从1:10稀释度始,作5倍比稀释。
参考网址on http://www.bio1000.com/zt/experiment/284333.html
举报 2018-02-05 13:42
本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。二抗是根据一抗来选的。这种情况是需要先选择一抗(一抗的要求是能做组化,而且要是抗人的,因样本是人来源的,如果是石蜡片,那一抗的应用最起码要包含IHP,冰冻片就是IHF),一抗的种类以兔多抗和小鼠单抗为主,要根据肿浆的需要选择。因为一抗与二抗是抗原抗体的结合,所以如果一抗是兔多抗,二抗就要选XX抗兔IgG(以羊抗兔居多),同理一抗为小鼠单抗,二抗就是XX抗小鼠IgG。另外封闭液最好选与二抗同种属的血清,比如羊血清。
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