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收藏  |   举报 2010-09-09 16:46   关注：200   回答：2

【求助】梯度PCR有条带，恒温扩增无条带...

已解决 悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-22 18:02
【求助】梯度PCR有条带，恒温扩增无条带
举报 2010-09-17 04:13
myclcer机器在美国是学生机，稳定性不好，建议换机器。杯具
举报 2010-09-16 06:29
要考虑一下 在TD的时候能遇到那几个温度 比如 你是每个循环降一度 那第二个循环的时候理论上是52度但是 PCR仪的实际温度不一定是52度。 而且可能跟你设计恒温的52度也会稍有差异
建议你可以把温度在细分一下，然后多扩增几个循环 有时候可能是丰度低的问题 可以增加到40个循环
另外可以尝试一下 把变性的94° 延长为45秒，虽然这个在理论上似乎没太大意义~但是我个人觉得还是很好用的~
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