货号: | E1WP311 |
供应商: | Enogene |
数量: | 999 |
规格: | 100mL |
(EnoGene™ Stripping Buffer)
一、产品介绍
Western抗体清除液(Stripping Buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用抗体清除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
本Western抗体清除液通常可以重复利用膜2-3次。只需大约2h即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
二、试剂盒组份
组 份 | E1WP311 | 储存 |
抗体清除液 | 100 ml | 室温 |
1、 在完成Western Blot化学发光检测后,将膜置于适量(至少需将膜完全覆盖)的蒸馏水中漂洗5min。
2、 弃蒸馏水,加入适量Western Blot抗体清除液,在摇床上室温漂洗两次,每次20min。
3、 弃Western Blot抗体清除液,并吸尽残余液体;然后加入适量的TBS、TBST或PBS漂洗3-4次,每次5min。
4、 进行封闭(Blocking)等Western Blot的后续操作。
四、注意事项:
1、 为取得最佳效果,推荐使用PVDF膜。
2、 如多次重复使用同一张膜5次以上,有可能会导致蛋白信号的减弱,建议膜重复使用不超过5次。
3、 使用ECL等类似的化学发光试剂进行的Western Blot检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测,例如DAB,NBT/BCIP等,不适用于本试剂。
4、 在遇到抗体清除效果欠佳时,可以考虑适当延长抗体清除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时抗体的清除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的抗体清除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western抗体清除液。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
五、保存条件:
室温(RT)保存。
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