货号: | BA30 |
数量: | 99 |
保存条件: | -20度 |
规格: | 20次/50次/100次 |
Caspase 3 活性分光光度法检测试剂盒(Caspase 3 Activity Colorimetric Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中Caspase 3酶活性或纯化的Caspase 3酶活性的试剂盒。
Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain,有时被写作caspase-3或caspase3,属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),是细胞凋亡过程中的一个关键酶。Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase。Caspase 3可以剪切procaspase 2、6、7和9,并可以直接特异性剪切许多caspase 底物, 包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase) , ICAD (Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease),gelsolin和fodrin等。这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention) ,DNA片段化(DNA fragmentation)等。同时caspase 3对细胞起泡(Cell blebbing)也起到关键作用。Caspase-3在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;但在细胞发生凋亡阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基和两个小亚基组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。
Caspase-3分光光度法检测试剂盒就是将caspase-3序列特异性的多肽(Ac-DEVD-pNA (acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)偶联至黄色基团:pNA (p-nitroaniline);当该底物被Caspase-3剪切后, 黄色基团pNA即游离出来,
可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,考察caspase-3的活化程度。pNA在405nm附近有强吸收。
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织caspase-3活性的检测。
二、试剂盒组份
组份 | Cat:BA3020 20 assays | Cat:BA3050 50 assays | Cat:BA30100 100 assays | 储存条件 |
裂解液 | 5.0 mL | 10.0 mL | 15.0 mL | 4℃ |
2×反应液 | 1.0 mL | 2. 5 mL | 5.0 mL | 4℃ |
Ac-DEVD-pNA | 100μL | 250μL | 500μL | -20℃,避光 |
DTT | 50 μL | 100 μL | 150 μL | -20℃ |