货号: | KL-GS-0031 |
保存条件: | -80℃ |
规格: | 100μl |
1、本产品采用干冰运输,收到后请直接冻存于-80℃冰箱。2、取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化;3、加入1μl纯质粒,轻轻吹打混匀,冰浴30min;4、将菌液放入42℃水浴中热激45sec,立即放入冰浴中2min;5、加入900μl SOC/LB培养基,于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育;6、将菌液5000rpm×5min离心,弃尽上清;7、取100μl新鲜LB培养基将菌体打散,均匀涂布于对应抗性平板表面;8、平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕,再倒置37℃培养过夜。
基因型
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm trxB15::kan
菌株介绍
BL21 trxB(DE3)感受态细胞菌株是常用的目的蛋白表达菌株,该菌株有利于目的蛋白二硫键在细胞质中的形成,能有效提高含二硫键蛋白的正确折叠和表达。
BL21trxB宿主菌拥有与AD494菌株相同的硫氧还蛋白还原酶突变体(thioredoxin reductase mutation,TrxB)突变体。该菌株来源于BL21菌株。由于含有trxB蛋白的宿主菌能够有效提高细胞质内二硫键形成,他们能够提高目的蛋白的 正确折叠率。该宿主菌具有卡那霉素抗性,所以这个菌株只能用于氨苄霉素抗性的质粒表达。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
BL21 TrxB 菌株在蛋白酶缺陷 BL21 背景上具有与 AD494 菌株相同的硫氧还蛋白还原酶突变 ( trxB ) 。由于 trxB 宿主有利于胞浆内二硫键形成,它们的使用可增加正确折迭的蛋白组分。 TrxB 突变可用卡那霉素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的质粒。