货号: | SL100488-L |
保存条件: | 4°C |
供应商: | 济南思科生物科技有限公司 |
数量: | 现货 大量 |
英文名: | GenJet™ In Vitro DNA Transfection Reagent |
保质期: | 1年 |
规格: | 毫升 |
简介
GenJet™体外DNA转染试剂是一种新结构类型的DNA转染试剂。该转染试剂为阳离子聚合物和脂质体的杂合体,具有转染效率高、重复性好、毒性低和稳定性极强的特点(室温条件下可保存18个月!),目前该DNA转染试剂为我公司独家产品。GenJet™转染试剂用于哺乳动物细胞的转染,如肿瘤细胞系(常见的细胞有HEK293, CHO, COS-1, COS-7, Hela, NIH3T3等)和原代培养的细胞以及昆虫细胞sf9, sf21等。GenJet™试剂,1.0 ml,可用于24孔板转染333次或者6孔板166次转染操作。
应用
- 将DNA导入哺乳动物细胞和昆虫细胞
- 同病毒协同转染难转哺乳动物细胞,可显著增强病毒的转染效率(可增高200倍)
特点
- 对哺乳动物细胞有极高的转染效率
- 可获得极高滴度的病毒(如慢病毒, AAV等)
- 对大片段DNA分子(大到180 kb)有同样高的转染效率
- 对单个DNA或多个DNA共转染具有同样好的效率
- 可获得高水平的重组蛋白表达
- 不受血清和抗生素的影响
- 对难转原代细胞有较好的转染效率
保存条件
该产品于4~23°C保存,可稳定18个月。
GenJet™转染试剂哺乳动物细胞转染谱
Cell Lines | Transfection Efficiency (% GFP) | Cell Lines | Transfection Efficiency (% GFP) |
3LL B16-F10 BAEC BHK-21 Ca Ski CaCo-2 CHO HCS-2/8 HEK-293 HeLa HLMEC H-MVEC Huh-7D12 ATT20 SK-N-SH McArdle 7777 Hep3D SHEP MDA-MB-231 3T3-442A COS-7 CV-1 D 407 DHD Pro.b LS180 | 51% 72% 52% 86% 78% 32% 83% 42% 80-90% 81% 50-65% 49% 22% 38% 20% 60% 78% 71% 38% 10% 60-70% 53% 62% 51% 46% | K562 L929 MCF-7 MDCK Neuro2A NIH 3T3 PC12 SH-SY5Y SiHa SKOV3 HUVEC IGROV1 Jurkat 6CSFMEo WEHI 231 SAOS-2 SN56 MC3T3-E1 BT474 C2C12 Primary melanocyte Hela-S3 A549 Hep G2 | 22% 52% 51% 52% 72% 88% 34% 14% 62% 52% 51% 21% 5%-15% 73% 25% 52% 69% 70% 46% 46% 46% 78% 78% 58% |
GenJet™体外DNA转染试剂同市场上知名品牌的比较
GenJet™转染试剂对哺乳动物细胞有极高的转染效率。绿色荧光蛋白(GFP)基因(pEGFP-N3)分别由GenJet™ 转染试剂(上图)和罗氏集团的FuGene 6转染试剂(下图)导入HEK293细胞。转染24小时后,尼康荧光显微镜(Nikon Eclipse 2000 Fluorescence microscope)用于记录细胞的相差图(DIC, 左侧图)和细胞荧光图(FITC滤光片,右侧图)
GenJet™转染试剂可获得极高的慢病毒(lentivirus)滴度。 三种DNAs分别由GenJet™转染试剂(左侧图)和Invitrogen公司的LipoFectamine 2000™转染试剂(L2K, 右侧图)导入HEK293FT细胞以生产慢病毒。所产病毒的滴度用如下方法测定:分别取293FT细胞上清10微升和100微升用于感染另一株293细胞,所感染293细胞经过流式细胞仪(FACS)分拣获得感染GFP的百分率(如图的右上方框内)。经过测算,GenJet™转染试剂和L2K试剂转染所得的慢病毒滴度分别为7.9x106 and 3.1x106 tu/毫升
GenJet™转染试剂由于原代培养细胞的转染。绿色荧光蛋白(GFP)基因(pEGFP-C1)分别由GenJet™转染试剂(上图)和罗氏公司的Fugene HD转染试剂(下图)导入原代培养的小鼠皮肤成纤维母细胞(Primary Murine Skin Fibroblast)。转染24小时后,尼康荧光显微镜(Nikon Eclipse 2000 Fluorescence microscope)用于记录细胞的相差图(DIC, 左侧图)和细胞荧光图(FITC滤光片,右侧图)
GenJet™转染试剂由于难转原代培养细胞的转染。绿色荧光蛋白(GFP)基因(pEGFP-C1)分别由GenJet™转染试剂(上图)和罗氏公司的Fugene HD转染试剂(下图)导入原代培养的小鼠角质细胞(Primary Murine Keratinocytes)。转染24小时后,尼康荧光显微镜(Nikon Eclipse 2000 Fluorescence microscope)用于记录细胞的相差图(DIC, 左侧图)和细胞荧光图(FITC滤光片,右侧图)
GenJet™转染试剂毒性极低。GenJet™转染试剂同Invitrogen公司的lipofectamine 2000转染试剂毒性的比较。GenJet™转染试剂(左图)和lipofectamine 2000(右图)分别在无血清条件下转染小鼠原代皮肤成纤维母细胞(Primary Murine Skin Fibroblast),4小时后,无血清培养基换成含有10%胎牛血清的 DMEM高糖培养基。24小时后细胞相差图由一尼康荧光显微镜(Nikon Eclipse 2000 Fluorescence microscope)记录
产品使用说明及操作步骤
- GenJet™ In Vitro DNA Transfection Reagent FAQ
- GenJet™ In Vitro DNA Transfection Insert Sheet
- Transfection of Sf9 Insect Cells with GenJet™
- Cell Datbase
- GenJet™ MSDS
- Data Sheet & Protocol