货号: | M062 |
数量: | 大量 |
规格: | ≥100T |
瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质、原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。瑞氏染液为蓝色澄明液体,有甲醇特异香味,主要由美蓝、伊红Y、甲醇、甘油组成,其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红和固定细胞形态。
基姆萨染液由天青,伊红(质)组成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。但本法对细胞核(蓝)和寄生虫着色较好,结构显示更不清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释基姆萨液代替缓冲液,按瑞氏染色法染10min。或先用瑞氏染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染
试剂盒组成:
产品编号 | 试剂名称 | 体积(ml) |
M062A | 瑞氏染色液 | 100ml |
M062B | 吉姆萨染色液 | 100ml |
M062C | 磷酸盐缓冲液pH6.8 | 500ml |
按常规涂片、空气干燥、4%多聚甲醛固定.
操作步骤
- 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
- 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上
- 滴加Wright stain覆盖涂片,室温染色1~2min,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,
- 后,滴入磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8)(染液与缓冲液的比例约为1:1.5,冬季1:1,夏季1:2)。以气囊向玻璃片上轻轻打气,使染液和缓冲液混合均匀,一般不宜口吹起,以免呼出二氧化碳改变缓冲液酸碱度而影响染色
- 用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗
- 稀释染液(取磷酸缓冲液9份,吉姆萨染液1份充分混合),将染液滴在组织或细胞上,滴染10~15min。
- 蒸馏水漂洗干净,紧急时趁湿加盖玻片镜检;
- 干燥。
- 镜检:先用低倍镜观察血涂片,再用油镜.
将干燥后的血涂片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。在显微镜下,成熟红细胞染成粉红色;血小板染成紫色;中性粒细胞胞质染成粉红色,含紫红色颗粒;嗜酸性粒细胞含大的桔黄色颗粒;嗜碱性粒细胞胞质含有大量深紫蓝色颗粒;单核细胞胞质染成灰蓝色;淋巴细胞胞质染成淡蓝色。
体会与说明
- 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色结果;
- 涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
- 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染;
- 染液用好后要及时盖紧瓶盖,防止甲醇挥发!