货号: | D2600 |
保存条件: | RT |
供应商: | solarbio |
数量: | 大量 |
英文名: | 土壤基因组DNA提取试剂盒 |
保质期: | 1年以上 |
规格: | 50T/100T |
2 货号:D2600
3 规格:50T/ 100T
4 保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12 个月,2℃-8℃保存时间更长。
5 试剂盒内容: D2600-50T D2600-100T
溶液A 25ml 50ml
溶液B 3ml 6ml
溶液C 5ml 10ml
溶液D 10ml 20ml
漂洗液 15ml 15ml×2
洗脱液 10ml 20ml
吸附柱 50 个 100 个
收集管 50 个 100 个
PCR 增强剂 500ul 1ml
说明书 1 份 1 份
6 注:试剂盒开封后溶液A、B、C、D需在2-8℃保存。PCR增强剂-20℃保存
7 基因组DNA提取试剂盒简介:
(1)DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物
学研究的主要对象,为了进行测序、杂交、基因表达、文库构建
等试验,获得高分子量和高纯度的基因组DNA是非常重要的前
提,因此基因组DNA的提取也是分子生物学试验技术中最重要、
最基本的操作之一。
(2)Solarbio公司提供各种不同样品基因组DNA提取试剂盒,如植物、
动物、细菌、细胞、血液、酵母等基因组DNA提取试剂盒。所提
取的基因组纯度高,片段大小在50kb左右。用户可根据需要选用
不同的试剂盒来进行不同样品的抽提。
(3)基因组DNA提取的原则:
1、保证核酸一级结构的完整性(因为遗传信息全部储存在核酸一级
结构中,故完整的一级结构是保证核酸结构与功能研究的基础)。
2、排除其它分子(如蛋白质、多糖、脂类、有机溶剂等)的污染,使下游试验顺利进行。
(4)基因组DNA提取的原理和方法:
DNA与组蛋白构成核小体,核小体缠绕成中空的螺旋管状结构,即染色丝,染色丝再与许多非组蛋白形成染色体。染色体存在于细胞核中,外有核膜及胞膜。从组织中提取DNA必须先将组织分散成单个细胞,然后破碎胞膜及核膜,使染色体释放出来,同时去除与DNA结合的组蛋白及非组蛋白。
8 产品简介:
本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌
有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多态性。
本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料,可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA 的
产率,纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、
Southern 杂交等实验。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机
在室温下离心。
1、称取土壤样本0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成细粉末,加入450ul 溶液A 震荡混匀。
* 也可直接称取样本0.1-0.5g 于离心管(建议使用2ml 圆底管),加入450ul 溶液A 剧烈震荡混匀
1-2min 至没有固体块。使用液氮研磨效果最佳。
2、加入50ul 溶液B 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡),65℃水浴6min,每2min 充分颠倒混匀一次。
3、加入100ul 溶液C 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡),12000rpm离心10min 。
4、将上清转移到新的离心管,12000rpm离心2min 。
5、在吸附柱中加入200ul 溶液D ,将离心后的上清加入到带有溶液D 的吸附柱中,用移液器吹吸几次混
匀,12000rpm离心1min。
6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱( 必须),12000rpm离心1min。
7、倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液500ul,12000rpm离心1min。
8、倒掉收集管中的废液,重复步骤7 两次(共漂洗三次)。
9、倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000rpm离心2min 。
10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等),或50℃干燥1min。
11、将吸附柱放入一个新的离心管中,加入50-100ul 洗脱液(65 ℃预热),12000rpm离心1min。
12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000rpm离心1min。离心管中即为土壤微生物DNA 溶液。
13、若产物PCR 效果差,可以适当稀释DNA产物,或添加1/10 体积的PCR 增强剂。
注意事项:
1、新鲜的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2、若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈,不会影响结果。
3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。
4、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul ,体积过小会影响回收效率;建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液,
用水洗脱也会损失部分产物;DNA 应保存在-20 ℃避免反复冻融,以防降解。
5、若产物含有腐殖质残余则会严重影响DNA的光吸收值,应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方
式鉴定。
6、液体试剂避免接触皮肤,若意外接触应立即
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