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大鼠原代心肌细胞

产品价格: ¥2688.00

最小起订量:暂无 可售数量:999盒

发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-20 01:30:01
浏览次数:
27

产品详情

品牌名称:
iMedCell
货号: ME-2002006
规格: 1×106cells/管
iMedcell ® 大鼠原代心肌细胞
 
●大鼠原代心肌细胞规格:1×106cells/
大鼠原代心肌细活细胞运输:收到细胞后,请立即放入培养箱中培养;
   大鼠原代心肌细冻存细胞运输:可暂存于-80℃冰箱或液氮长期储存。
 
大鼠原代心肌细胞产品简介:
    大鼠原代心肌细胞产品是一种高纯度、高活性的细胞产品。该产品采用埃德斯生物的无血清、化学成分明确的大鼠原代心肌细胞分离试剂盒进行细胞分离、培养,可分离得到高纯度、高活性的原代心肌细胞,这些细胞具有典型的心肌细胞电生理特性,自律性、兴奋性、传导性、收缩性。
 
大鼠原代心肌细胞包含材料:
产品货号 名称 规格 数量
ME-2002006 大鼠原代心肌细胞 1×106 1瓶(支)
ME-1002017 大鼠心肌细胞分离试剂盒 100 ml 1
 
实验材料
实验试剂
大鼠原代心肌细胞分离试剂盒iMedCell: Cat. no.ME -1002017
实验仪器设备

六孔板/十二孔板
二氧化碳培养箱

实验准备
A. 使用75%酒精擦拭试验台;
B. 准备酒精灯、酒精棉及用于盛放实验处理后大鼠的垃圾袋;
C. 剪刀、镊子、微型镊子等解剖用具需提前进行灭菌处理;
D. 吸取适量Wash Buffer至培养皿中并放置于冰上(细胞房内操作)。
注意:细胞房和超净工作台需提前进行紫外灭菌处理;培养皿大小的选择取决于实验时所取心脏的数目,Wash Buffer一直放于冰上保持低温。
  1. Cell Dissociation Solution4融化,快速分装,并放-20长期保存,不要反复冻存。
F. 培养板分别用Ready-to-use Gel ⅠReady-to-use Gel Ⅱ提前60min包被。
操作方法
  1. 取心脏
  1. 左手捏住大鼠背部皮肤,使用酒精棉(75%酒精)擦拭小鼠胸腹,用解剖剪在小鼠剑突处正中线偏左向上剪开,略压胸骨,使心脏自然跳出,用弯镊子勾住心脏根部,取出心脏,置于盛有遇冷Wash buffer的培养皿中。
  2. 在解剖镜下使用微型镊子和解剖剪剪去心房。
  1. 组织清洗
经酒精擦拭后,将培养皿移入细胞房超净工作台,用预冷的Wash buffer清洗3次,去除血污后,将心脏剪成约1mm3的组织块,再清洗2次。
  1. 预消化
加入1-3ml Cell Dissociation Solution 37℃水浴中摇动,消化1min后弃上清。
  1. 消化
  1. 50ml离心管中加入Cell Dissociation Solution37℃水浴中摇动消化7min后将上清液加入遇冷的1ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium中,混合均匀并置于冰上,保持低温。
注意:每次Cell Dissociation Solution使用的量可根据组织块的多少进行调整。
  1. 重复4.A的步骤直至组织完全消化。
注意:吸取上清时尽量避免吸出沉淀。
  1. 将收集的上清在室温下1260rpm,离心5min,轻轻吸除上清,用Rat Cardiomyocytes Culture Medium重悬细胞。
  1. 差速贴壁:
取出Ready-to-use Gel Ⅰ提前包被的培养板,吸掉培养板中液体将重悬的细胞经过70um/100μm滤膜过滤后铺入包被好的培养板中,放入细胞培养箱37℃5%CO2中孵育60min
  1. 细胞铺板:
  1. Ready-to-use Gel Ⅱ提前包被培养板,吸掉上清,60min后,取上一步差速贴壁上清,并将未贴壁细胞转移至包被好的培养板中。
  2. 取出培养皿,将上清移入15ml离心管中,1260rpm,离心5min,轻轻吸除上清,用已经预先加热至37℃1-2ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium重悬细胞。利用血细胞计数板进行细胞计数,用台盼蓝检测细胞存活率。根据所计的细胞数使用Rat Cardiomyocytes Culture Medium进行稀释调整细胞浓度,将细胞移至预先使用Ready-to-use Gel包被过的48孔板或3.5cm培养皿中。
  1. 细胞培养
将培养板放入细胞培养箱中培养24h后观察细胞状态,若细胞状态佳且浓度合适,则可进行后续实验。

大鼠心肌细胞产品图



 
 

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