货号: | ME-2002006 |
规格: | 1×106cells/管 |
●大鼠原代心肌细胞规格:1×106cells/管
●大鼠原代心肌细活细胞运输:收到细胞后,请立即放入培养箱中培养;
大鼠原代心肌细冻存细胞运输:可暂存于-80℃冰箱或液氮长期储存。
大鼠原代心肌细胞产品简介:
大鼠原代心肌细胞产品是一种高纯度、高活性的细胞产品。该产品采用埃德斯生物的无血清、化学成分明确的大鼠原代心肌细胞分离试剂盒进行细胞分离、培养,可分离得到高纯度、高活性的原代心肌细胞,这些细胞具有典型的心肌细胞电生理特性,自律性、兴奋性、传导性、收缩性。
大鼠原代心肌细胞包含材料:
产品货号 | 名称 | 规格 | 数量 |
ME-2002006 | 大鼠原代心肌细胞 | 1×106 | 1瓶(支) |
ME-1002017 | 大鼠心肌细胞分离试剂盒 | 100 ml | 1瓶 |
实验材料
●实验试剂
大鼠原代心肌细胞分离试剂盒(iMedCell: Cat. no.ME -1002017)
●实验仪器设备
六孔板/十二孔板
二氧化碳培养箱
实验准备
A. 使用75%酒精擦拭试验台;
B. 准备酒精灯、酒精棉及用于盛放实验处理后大鼠的垃圾袋;
C. 剪刀、镊子、微型镊子等解剖用具需提前进行灭菌处理;
D. 吸取适量Wash Buffer至培养皿中并放置于冰上(细胞房内操作)。
注意:细胞房和超净工作台需提前进行紫外灭菌处理;培养皿大小的选择取决于实验时所取心脏的数目,Wash Buffer一直放于冰上保持低温。
- Cell Dissociation Solution在4℃融化,快速分装,并放-20℃长期保存,不要反复冻存。
操作方法
- 取心脏
- 左手捏住大鼠背部皮肤,使用酒精棉(75%酒精)擦拭小鼠胸腹,用解剖剪在小鼠剑突处正中线偏左向上剪开,略压胸骨,使心脏自然跳出,用弯镊子勾住心脏根部,取出心脏,置于盛有遇冷Wash buffer的培养皿中。
- 在解剖镜下使用微型镊子和解剖剪剪去心房。
- 组织清洗
- 预消化
- 消化
- 在50ml离心管中加入Cell Dissociation Solution,37℃水浴中摇动消化7min后将上清液加入遇冷的1ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium中,混合均匀并置于冰上,保持低温。
- 重复4.A的步骤直至组织完全消化。
- 将收集的上清在室温下1260rpm,离心5min,轻轻吸除上清,用Rat Cardiomyocytes Culture Medium重悬细胞。
- 差速贴壁:
- 细胞铺板:
- Ready-to-use Gel Ⅱ提前包被培养板,吸掉上清,60min后,取上一步差速贴壁上清,并将未贴壁细胞转移至包被好的培养板中。
- 取出培养皿,将上清移入15ml离心管中,1260rpm,离心5min,轻轻吸除上清,用已经预先加热至37℃的1-2ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium重悬细胞。利用血细胞计数板进行细胞计数,用台盼蓝检测细胞存活率。根据所计的细胞数使用Rat Cardiomyocytes Culture Medium进行稀释调整细胞浓度,将细胞移至预先使用Ready-to-use GelⅡ包被过的48孔板或3.5cm培养皿中。
- 细胞培养
大鼠心肌细胞产品图