货号: | BC209-02 |
运输方式: | 干冰运输 |
细胞类型: | Shuffle T7-B感受态细胞 |
供应商: | 南京赛泓瑞 |
数量: | 大量 |
产品介绍
Shuffle T7-B菌株为大肠杆菌BL21增强型菌株,为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,适用于T7启动子启动的蛋白表达。细胞内组成型表达的二硫键异构酶DsbC不仅有利于表达蛋白形成正确的二硫键,并具有分子伴侣的功能,帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域,基因组中无λ前噬菌体序列,具有抗T1噬菌体感染特点。Shuffle T7-B感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于10的6次方cfu/μg DNA。
Shuffle T7-B感受态细胞产品特点
对氨苄青霉素,氯霉素,卡那霉素和四环素敏感,对链霉素和壮观霉素有抗性。
Shuffle T7-B感受态细胞产品储存
-70℃保存,避免反复冻融。
Shuffle T7-B 感受态细胞 目录号:BC209 储存条件:-70℃保存,避免反复冻融。
产品说明: Shuffle T7-B 菌株为大肠杆菌 BL21 增强型菌株,为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型,适用于 T7 启动子启动的 蛋白表达。细胞内组成型表达的二硫键异构酶 DsbC 不仅有利于表达蛋白形成正确的二硫键,并具有分子伴侣 的功能,帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。T7 RNA 聚合酶基因整合在细菌染色体上的 lac 操纵子区域,基因 组中无λ前噬菌体序列,具有抗 T1 噬菌体感染特点。Shuffle T7-B 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒 检测转化效率大于 10 6 cfu/μg DNA。 基因型: fhuA2lacZ::T7gene1[lon]ompTahpCgalλatt::pNEB3-r1-cDsbC(Spec R lacIq)ΔtrxBsulA11R(mcr-73::miniTn10-Tet S )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10 --TetS ) endA1 Δgor ∆(mcrC-mrr)114::IS10 菌株抗性:对氨苄青霉素,氯霉素,卡那霉素和四环素敏感,对链霉素和壮观霉素有抗性。 质粒转化步骤: 1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入 1-5μl 含有 1-100ng 的质粒 DNA 到细胞中, 用手指拨打管底,轻轻混匀; 2. 冰水浴中放置 30 分钟,不要晃动;
Shuffle T7-B感受态细胞
3. 42℃热击 60 秒钟,不要晃动; 4. 冰水浴中放置 2 分钟,不要晃动; 5. 加入 500μl 的室温的 SOC 或 LB 培养基; 6. 置于 30℃摇床中,150-200rpm,复苏培养 60 分钟; 7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后,倒置平板 30℃培养 12-24 小时。 (平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm 离心 30 秒钟,弃掉上清,留 100μl 左右的液体,用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块,取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的 液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落) (质粒快速转化步骤:将步骤 2 的时间缩短到 5 分钟,对于氨苄青霉素抗性的质粒,步骤 4 完成后,可直 接涂布或划线于含抗生素的平板上。其它抗性的质粒仍需 40-60 分钟的复苏培养。) 组成 BC209-01 BC209-02 ShuffleT7-B Competent cells 10×100μl 20×100μl pUC19(0.1ng/μl) 5μl 5μl 蛋白表达步骤: 1. 挑取单菌落,接种到含 5ml 带抗生素的 LB 培养基中; 2. 30℃,200rpm 震荡培养细菌至对数生长期(OD600=0.4-0.8); 3. 加入 IPTG 到终浓度为 0.4mM,30℃诱导 4 小时或 16℃诱导过夜; 4. 诱导完成后,离心收集菌体,用合适的方法(如考马斯亮蓝染胶法,Western-Blot法或酶活性分析法) 分析菌体裂解物的总蛋白、上清和沉淀组分,明确表达产物的表达状况(可溶性或不溶性表达); 5. 重组蛋白大量表达时,可用 10ml 过夜培养物转接到 1L 培养基中,当培养到 OD600=0.4-0.8 时,加入终 浓度为 0.4mM 的 IPTG,30℃诱导 4 小时或 16℃诱导过夜(不同蛋白表达的最佳条件有所不同,需在 实验中优化)。XL1-Blue感受态细胞产品
具体产品详细信息可以点击表格里对应的产品,欢迎广大新老客户咨询订购!!
大肠杆菌化学感受态细胞 | |||
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
BC101-02 | TOP10 感受态细胞 | 20*100μl | 240.00 |
BC102-02 | DH5a感受态细胞 | 20*100μl | 240.00 |
BC103-02 | JM109 感受态细胞 | 20*100μl | 240.00 |
BC104-02 | XL1-Blue 感受态细胞 | 20*100μl | 346.00 |
BC105-02 | Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞 | 20*100μl | 240.00 |
BC106-02 | DH10B 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC107-02 | OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC108-01 | Stbl3 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC109-01 | XL10-Gold 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC110-01 | JM110 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC111-01 | DB3.1 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC112-01 | DH10BAC 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC113-01 | NEB 10-beta 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC114-01 | BJ5183-AD-1 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC115-01 | Stbl4 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC201-02 | BL21(DE3) 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC202-02 | BL21(DE3)plysS 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC203-02 | M15 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC204-02 | Rosetta(DE3) 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC205-02 | OrigamiB(DE3) 感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC206-02 | T7表达感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC207-02 | T7pLysY感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC208-02 | Shuffle T7-K12感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC209-02 | Shuffle T7-B感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
大肠杆菌电转感受态细胞 | |||
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
BC401-01 | NEB 10-beta 电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC402-01 | BJ5183 电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC403-01 | BJ5183-AD-1 电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC404-01 | TOP10电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC405-01 | DH5a 感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
农杆菌化学感受态细胞 | |||
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
BC301-01 | LBA4404农杆菌感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC302-01 | AGL1农杆菌感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC303-01 | EHA105农杆菌感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
BC304-01 | GV3101农杆菌感受态细胞 | 20*100μl | 420.00 |
农杆菌电转感受态细胞 | |||
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
BC305-01 | LBA4404农杆菌电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC306-01 | AGL1农杆菌电转感受电转态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC307-01 | EHA105农杆菌电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |
BC308-01 | GV3101农杆菌电转感受态细胞 | 20*50μl | 420.00 |