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流式细胞术（FCM）实验服务
MethylFlash Urine 5-Methylcytosin
JC-10
通过青浦区市场监督管理局认证 
兔干细胞完全培养基
小鼠组织树突状细胞分
兔血管内皮细胞分离液
兔外周血内皮祖细胞分
人滑膜肉瘤细胞
小鼠Th2细胞内因子检| 货号： | LPZ2014R |
| 供应商： | 上海研谨生物科技 |
| 数量： | 大量供应 |
| 英文名： | 上海研谨生物科技 |
| 规格： | 3X200ml/Kit |
产品类别：肿瘤细胞的分离
产品编号：LPZ2014R
产品名称：兔肿瘤组织淋巴、单核巨噬、粒细胞分离液试剂盒
产品规格：3X200ml/Kit
产品价格：￥1200.00元
本品用于分离兔肿瘤组织淋巴、单核巨噬、粒细胞
“XXXX”动物肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞
分离液实验方法
技术文档编号：TBD0052SOP
【产品规格】
3×200ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
【实验前准备】
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
红细胞，具体操作说明详见“红细胞裂解液使用说明”）到 15ml 离心管中，往所得离心
产品编号：LPZ2014R
产品名称：兔肿瘤组织淋巴、单核巨噬、粒细胞分离液试剂盒
产品规格：3X200ml/Kit
产品价格：￥1200.00元
本品用于分离兔肿瘤组织淋巴、单核巨噬、粒细胞
“XXXX”动物肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞
分离液实验方法
技术文档编号：TBD0052SOP
【产品规格】
3×200ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
| 名称 | 产品编号 | 规格 | |
| A | 分离液 1 | 200ml | |
| B | 分离液 2 | 200ml | |
| C | 分离液 3 | 200ml | |
| D | 试剂 F（赠品） | F2013TBD | 200ml |
| E | 样本稀释液（赠品） | 2010C1119 | 200ml |
| F | 清洗液（赠品） | 2010X1118 | 200ml |
| G | 说明书 | 1 份 | |
【实验前准备】
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
- 首先制备组织单细胞悬液，制备方法详见“组织单细胞悬液制备技术”。取一支适当的离心管，依次小心加入分离液 1、分离液 2、分离液 3（体积比为 3:2:1，体积总量与组织单细胞悬液体积相等），制成梯度界面，各液面分层一定要清晰。（如组织单细胞悬液样本量为 6ml，则加入分离液 1：3ml、分离液 2：2ml、分离液 3：1ml。）
- 用吸管小心吸取组织悬液样本加于分离液液面上，400-500g，离心 20-30min（注：根据组织悬液样本量确定离心条件，样本量越多，离心力越大，离心时间越长，最大离心力可达 1200g，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
- 离心后，此时离心管中将出现两层环状乳白色细胞层。
- 用吸管吸取两层环状目的细胞层（如有红细胞混杂则需用红细胞裂解液（需另购）裂解
红细胞，具体操作说明详见“红细胞裂解液使用说明”）到 15ml 离心管中，往所得离心
管中加入 10ml 清洗液（产品编号：2010X1118），混匀细胞。
【注意事项】
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
封后置常温保存。
【参考值（参考范围）】
本实验肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞提取率大于 80%。
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
- 250g，离心 10min。
- 弃上清。
- 用吸管以 5ml 清洗液（产品编号：2010X1118）重悬所得细胞。
- 250g，离心 10min。
- 重复 6、7、8，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。
【注意事项】
- 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取样 2h 内进行实验，样品存放时间越长，细胞分离效果越差。样品放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
- 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
- 如所实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
封后置常温保存。
【参考值（参考范围）】
本实验肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞提取率大于 80%。
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
| 红细胞 | 白细胞 | 血小板 | |||
| （4.0-10.0）×109 | |||||
| 含量（个/L） | （4.0-5.5）×1012 | 中性粒细胞 | 淋巴细胞 | 单核细胞 | （1.0-3.0）×1011 |
| 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | |||
| 【相关实验技术方案】 | |||||
- 组织单细胞悬液制备技术。
- 所获得肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞的培养技术。
- 所获得肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞的核酸提取技术。
- 所获得肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞的鉴定方法
A.流式细胞技术
B.免疫组化技术
C.原位杂交技术
D.PCR 技术
【可能存在的问题及解决方法】
1. 由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案如下表所示：
| 出现情况 | 出现原因 | 建议解决方案 |
| 离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层 | 转速过小或离心时间过短 | 适当增减转速 |
| 离心后目的细胞存在于分离液中 | 转速过大或离心时间过长 | |
| 离心后白环层弥散 | 细胞密度过大 | 调整细胞密度 |
| 离心后白环层太浅或看不见 | 细胞密度过小 | |
- 本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心，其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离心时间，对离心转速进行调整。
- 本分离液依照国际标准，全部使用药用级原料，性能指标与国产同类产品略有不同，可能出现红细胞沉降不完全的情况，可以适当加大离心转速。
注：在对离心条件进行调整时，离心转速的加减以 50-100g 为基数，直至达到最佳分离效果，
离心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
温馨提示：不可用于临床治疗。
