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p-NPP 对硝基苯磷酸二钠盐
2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上样缓冲液
HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), 1 m
[VIP第1年] 指数:3
通过沈阳市浑南区市场监督管理局认证 
Wnt-11
CTNNG/γ-Catenin/JUP
GAPDH
10%SDS
P-JAK2（Tyr1007/1008
细胞增殖MTT/CCK-8
HUVEC
SH-SY5Y| 货号： | WLA064b |
| 保存条件： | 4℃避光 |
| 规格： | 96T |
产品概述：碱性磷酸酶ALP几乎存在于身体各种组织中，是膜结合酶。肠上皮、肾小管、成骨细胞、肝脏、胎盘及白细胞中尤其丰富。血清中AKP主要来源于肝和骨。AKP与肠内脂质转移及骨质钙化有关。血清AKP测定对肝胆系统及骨骼系统疾病的研究有参考意义。
本试剂盒可测动物血清（浆）、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。
保存日期：本试剂盒自订购之日起6月内有效。
操作流程:
一、样本前处理：
1. 血清（浆）：可直接取样用于测定（个别含量过高的样本需要稀释后测定，如鸡血清（浆）中ALP活力 较高，一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测）。
2. 组织：准确称取待测组织的重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水进行匀浆，2500rpm，离心10min，取上清液进行测定。
3. 细胞培养液：吸取细胞培养液，1000-1500rpm，离心10min，取上清液进行测定。
4. 培养细胞：
a. 培养细胞的收集：
悬浮培养细胞：可直接通过离心收集沉淀细胞（1000rpm，离心10min，弃上清留沉淀细胞）。
贴壁培养的细胞：吸去上清，可通过细胞刮直接将细胞刮下，然后1000rpm，离心10min弃上清， 留沉淀细胞，再加入1mlPBS轻轻吹打，再次1000rpm，离心10min弃上清，留沉淀细胞待用。
b. 培养细胞的破碎：在细胞沉淀中加入一定量（108 的细胞一般加0.3-0.5ml）的缓冲液（缓冲液可以用 PBS或者是生理盐水），需保证超声探头在液面以下。功率300W，冰水浴，每3-5s超声一次，间隔4次 （每次间隔时间为30s左右）
二、测定过程参考操作表如下：
充分混匀，37℃水浴，15min
轻轻振摇孔板混匀，波长520nm，酶标仪测定各孔吸光度OD值。
三、计算公式
1. 血清（浆）中ALP活力计算公式：
单位定义：100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
血清中ALP活力 （金氏单位/100ml） =测定OD值 - 空白OD值/ 标准OD值 - 空白OD值x酚标准品浓度 （0.1mg/ml）x 100mlx 样本测定前稀释倍数
2. 组织样本中ALP活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
组织中ALP活力 （金氏单位/gprot）= 测定OD值 - 空白OD值/ 标准OD值 - 空白OD值x酚标准品浓度 （0.1mg/ml）÷待测样本蛋白浓度 （gprot/ml）
3. 培养液中ALP活力计算公式：
单位定义：100ml 液体在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
培养液中ALP活力 （金氏单位/100ml）=测定OD值 - 空白OD值 /标准OD值 - 空白OD值x 酚标准品浓度 （0.02mg/ml）x 100ml x样本测定前稀释倍数
4. 培养细胞ALP活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位
培养细胞中ALP活力 （金氏单位/gprot） =测定OD值 - 空白OD值 /标准OD值 - 空白OD值x 酚标准品浓度 （0.02mg/ml）÷待测样本蛋白浓度 （gprot/ml）
详情请致电咨询：400-602-0407（转2号键）或登录公司官网 www.wanleibio.cn
操作流程:
一、样本前处理：
1. 血清（浆）：可直接取样用于测定（个别含量过高的样本需要稀释后测定，如鸡血清（浆）中ALP活力 较高，一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测）。
2. 组织：准确称取待测组织的重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水进行匀浆，2500rpm，离心10min，取上清液进行测定。
3. 细胞培养液：吸取细胞培养液，1000-1500rpm，离心10min，取上清液进行测定。
4. 培养细胞：
a. 培养细胞的收集：
悬浮培养细胞：可直接通过离心收集沉淀细胞（1000rpm，离心10min，弃上清留沉淀细胞）。
贴壁培养的细胞：吸去上清，可通过细胞刮直接将细胞刮下，然后1000rpm，离心10min弃上清， 留沉淀细胞，再加入1mlPBS轻轻吹打，再次1000rpm，离心10min弃上清，留沉淀细胞待用。
b. 培养细胞的破碎：在细胞沉淀中加入一定量（108 的细胞一般加0.3-0.5ml）的缓冲液（缓冲液可以用 PBS或者是生理盐水），需保证超声探头在液面以下。功率300W，冰水浴，每3-5s超声一次，间隔4次 （每次间隔时间为30s左右）
二、测定过程参考操作表如下：
| 试剂名称 | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
| 双蒸水（μl） | 5 | ||
| 0.1mg/ml酚标准工作液（μl） | 5 | ||
| 待测样本（μl） | 5 | ||
| 缓冲液（μl） | 50 | 50 | 50 |
| 基质液（μl） | 50 | 50 | 50 |
| 显色剂（μl） | 150 | 150 | 150 |
三、计算公式
1. 血清（浆）中ALP活力计算公式：
单位定义：100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
血清中ALP活力 （金氏单位/100ml） =测定OD值 - 空白OD值/ 标准OD值 - 空白OD值x酚标准品浓度 （0.1mg/ml）x 100mlx 样本测定前稀释倍数
2. 组织样本中ALP活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
组织中ALP活力 （金氏单位/gprot）= 测定OD值 - 空白OD值/ 标准OD值 - 空白OD值x酚标准品浓度 （0.1mg/ml）÷待测样本蛋白浓度 （gprot/ml）
3. 培养液中ALP活力计算公式：
单位定义：100ml 液体在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
培养液中ALP活力 （金氏单位/100ml）=测定OD值 - 空白OD值 /标准OD值 - 空白OD值x 酚标准品浓度 （0.02mg/ml）x 100ml x样本测定前稀释倍数
4. 培养细胞ALP活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位
培养细胞中ALP活力 （金氏单位/gprot） =测定OD值 - 空白OD值 /标准OD值 - 空白OD值x 酚标准品浓度 （0.02mg/ml）÷待测样本蛋白浓度 （gprot/ml）
详情请致电咨询：400-602-0407（转2号键）或登录公司官网 www.wanleibio.cn
温馨提示：不可用于临床治疗。
