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FastDNA® SPIN Kit for Soil
科研PC-9/GR人肺腺癌细胞吉非替尼耐药
Hacat（人永生化角质形成细胞）
[VIP第1年] 指数:3
通过闵行区市场监督管理局认证 
IV型胶原蛋白/4型胶原
MicroVue CICP EIA*| 货号： | AD9024 |
| 生长状态： | 贴壁 |
| 年限： | 长久 |
| 运输方式： | 常温运输或干冰运输 |
| 器官来源： | 见说明书 |
| 是否是肿瘤细胞： | 见说明书 |
| 细胞形态： | 成纤维细胞样 |
| 免疫类型： | 见说明书 |
| 物种来源： | 小鼠 |
| 相关疾病： | 见说明书 |
| 组织来源： | 小鼠 |
| 品系： | 细胞系 |
| ATCC Number： | 见说明书 |
| 细胞类型： | 见说明书 |
| 肿瘤类型： | 见说明书 |
| 供应商： | 上海信裕生物科技有限公司 |
| 数量： | T25培养瓶，1×106cells |
| 规格： | T25培养瓶，1×106cells |
细胞名称：小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14；MC3T3-E1 Subclone 14
物种：小鼠
规格：T25培养瓶，1×106cells
形态特征：成纤维细胞样
生长特性：贴壁
描述
该细胞是从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC3T3亚克隆4（ATCC CRL-2593）和MC3T3亚克隆14（ATCC CRL-2594）在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC3T3亚克隆24（ATCC CRL-2594）和MC3T3亚克隆30（ATCC CRL-2596）在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。
培养条件：α-MEM 10%FBS
传代方法：1:2传代；消化3-5分钟，3天可长满。
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶特点：细胞代数为2-3代
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
MC3T3-E1 Subclone 14细胞售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员，我们将尽快为您解决。
MC3T3-E1 Subclone 14细胞培养需要注意哪些问题
其实，刚刚复苏的细胞就像是刚刚出生的baby，非常脆弱，需要各位小伙伴的细心呵护，不然，细胞就会被我们花样玩死。为了避免细胞不明不白的挂掉，我们就要对细胞的各种习性了如指掌。1. 俗语道，到什么山上唱什么歌，不同细胞用不同的培养液。此时，就不得不提起培养基里的“四大金刚”—MEM、DMEM、1640、F-12，它们基本参与了90%以上种类细胞的培养过程。MEM能力非常全面，号称是应用最广泛的细胞培养液。DMEM作浓度要高出2~4倍，可分为高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型（含葡萄糖1000mg/L）。1640营养成分比较简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，常用于淋巴细胞的培养。F12常用来支持CHO、Hela和L－细胞生长以及原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞的培养。MEM和F12这两种培养基各取1/2，即可形成神经生物学最通用的培养基。在此，奉送一个不同细胞系对应的不同培养液的图，供大家参考。
| 细胞名称 | 细胞类型 | 物种 | 来源组织 | 培养液与血清 |
| 293 | 成纤维细胞 | 人 | 胚胎肾 | MEM,10%马血清 |
| 3T6 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| A549 | 上皮样 | 人 | 肺癌 | F-12K,10%FBS |
| A9 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 结缔组织 | DMEM，10%FBS |
| AtT-20 | 上皮样 | 小鼠 | 肿瘤 | F-10，15%马血清+2.5%FBS |
| BALB/3T3 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| BHK-21 | 成纤维细胞 | 仓鼠 | 肾 | DMEM，10%FBS or MEM,10%FBS and NEAA |
| BHL-100 | 上皮样 | 人 | 乳腺 | McCoy,sA,10%FBS |
| BT | 成纤维细胞 | 牛 | 鼻甲细胞 | MEM,10%FBS and NEAA |
| Caco-2 | 上皮样 | 人 | 结肠腺瘤 | MEM,20%FBS and NEAA |
| Chang | 上皮样 | 人 | 肝 | BEM，,10%牛血清 |
3. 当培养的贴壁细胞形态不好时，可在传代时，先倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清都可以）洗涤一次，用滴管吸走，再加入3ml培养基，沿着瓶底轻轻吹打一遍，然后吸走。这时在正式进行消化、吹打。其次，把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内，置于培养箱里培养，按时间点观察细胞贴壁情况（10min，20min，30min）。而后迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次，然后加入完全培养基培养并观察细胞生长情况以及形态。直至找到细胞完美的形态为止。
4. 至于在培养瓶中加入多少培养基量，则是需要实验汪们自己去摸索的。对于生长快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基，细胞形态会更好，但是要注意对换液时间的把握。
5. 如何选择培养瓶。一般，生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好；生长速度快的细胞，用玻璃瓶培养的效果会更好。因此，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候（比如细胞刚复苏时或者原代培养），塑料瓶会好一点；而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
6. 细胞冻存时，盖子要拧紧，不然复苏水浴时会渗水，造成细胞污染。因而冻存管要选择原配的管子和盖子（不同牌子、型号的管子会有差别），盖子拧紧后最好用封口膜封住。且每支冻存管都要标上细胞的名称、冻存时间，并记录在册，以免后续复苏细胞时，取错细胞。
7. 细胞冻存时要严格进行梯度降温（-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮）。要知道冰火两重天的生活环境只会让娇弱的细胞自爆身亡，谨记：缓降温！但如果真心赶时间时，可以使用细胞冻存盒进行细胞冻存，而后尽快将其转入液氮中。此外，要定期测量液氮罐里的液氮储备，以保证细胞全部浸在液面下。
8. 细胞解冻时，由于冻存管管壁较厚、隔热，而导致水浴时间太长（2min还没融化）时，可以将水浴锅的温度调至40℃左右，可以缩短解冻时间。
9. 提前预定超净台，减少复苏后插在冰盒里等待的时间，可避免细胞房人满为患，超净台使用紧张，复苏1h后，还没有加入新的培养液。（高浓度DMSO防止胞内形成冰晶，冻存时保护细胞，但复苏融解后，浸泡时间太久会对细胞有毒性）10. 复苏细胞时一定要有耐心，因为有些细胞在复苏一星期后才会真正有起色。因而，尽管细胞在复苏三四天后没有任何动静，也不要轻易倒掉所有细胞，要耐心等待，两周后再做决定。
11. 有关DMSO的一些注意事项：(1) DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内的离子浓度、减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤程度。(2) DMSO在溶解过程中会放热，应先与培养基混匀后再加血清，同时冻存液最好提前配置，DMSO现配对细胞的毒性可能更大；(3) 复苏时，要离心去除DMSO，并用新鲜的培养基洗涤1-2次，注意离心的时候速度不要太快。
