服务名称: | 腺病毒载体构建 |
腺病毒是一种无外壳的双链DNA病毒,基因组长约36kb,衣壳呈规则的20面体结构。腺病毒载体可高效地传递和表达较大基因片段的能力,由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,重组腺病毒已广泛地被应用于基础研究和临床试验中。 我们的腺病毒包装系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架,在克隆、包装、扩增等各部条件做了改进和优化,达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上,还拓展了更广泛的应用,可以提供各种带报告基因的,带不同标签的腺病毒构建和包装服务。所包装的腺病毒已成功应用于信号转导,基因转位,Co-IP,动物实验,干细胞研究等科研实验。 汉恒生物腺病毒包装系统: AdEasyTM包装系统 AdEasyTM包装系统主要的特点是利用Cre/loxP系统在大肠杆菌中完成外源基因插入腺病毒基因组的过程,获得环状的重组腺病毒基因组,并且具有在细菌中复制的必需元件。将重组腺病毒基因组酶切线性化后转染293细胞,避免了双质粒共转染得到重组腺病毒。由于获得重组腺病毒质粒有明显的筛选方法,操作步骤也比较好掌握,因此这个系统一出现就受到极大的欢迎。 AdMax包装系统 AdMax包装系统是通过Cre/loxP获得重组病毒,这个过程发生在293细胞中,从而避免在细菌中重组。将克隆了外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分基因组的包装质粒共转染293细胞,利用Cre/loxP系统的作用实现重组,产生重组腺病毒。这个系统有多种优势,包括操作简便、重组效率高、获得的病毒产率高(一般大于104vp/cell)、目的基因的表达水平高(因为mCMV启动子比hCMV启动子强若干倍)等。 汉恒生物腺病毒包装服务流程 根据不同的研究需求构建腺病毒穿梭载体,如用于RNAi的腺病毒载体、用于基因过表达的腺病毒载体、用于启动子活性研究的腺病毒载体等; 将腺病毒穿梭质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中,通过Cre/loxP系统的作用实现重组,产生重组腺病毒颗粒。 提供产品:
最后提供1ml 滴度>10^10PFU/ml(非纯化),大于10^11PFU/ml(纯化),并免费提供对应的腺病毒对照。
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