货号: | CM-H087 |
生长状态: | 良好 |
年限: | 长期保持 |
运输方式: | 快递运输 |
器官来源: | 详询客服人员 |
细胞形态: | 上皮细胞样 |
物种来源: | 人源 |
相关疾病: | 详询 |
组织来源: | 详见说明书 |
细胞类型: | 肿瘤细胞/正常细胞 |
数量: | 大量库存 |
规格: | T25培养瓶/冻存管 |
组织来源:结肠癌,转染插入到pCMV中的HPV E6
培养条件:MEM +10% FBS
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:RKO-E6细胞系是用脂质体法转染pCMV-E6的结肠癌RKO细胞系。该细胞含有稳定整合受控於巨细胞病毒启动子的人乳头状病毒(HPV)E6癌基因。RKO-E6细胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的细胞参数改变p53介导的转录和凋亡等。
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5-6ml完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数细胞培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。