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抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色

产品价格: ¥690.00

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发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-29 01:30:05
浏览次数:
32

产品详情

品牌名称:
歌凡
货号: M071
供应商: 上海歌凡生物科技有限公司
数量: 大量
保存条件: 4℃
规格: ≥100T
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色
货号:M071
原理:
TRAP染色反应 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)为破骨细胞的特异性标志酶,应用偶氮偶联组化分析法酶活性部位显示红色反应。以萘酚二磷酸盐为底物,偶氮副品红为显色剂,TRAP在酒石酸钾钠存在条件下将萘酚AS-BI磷酸盐水解为萘酚AS-BI,与显色剂结合形成红色沉淀。
  •  
组织固定:
  • 80%酒精固定;福尔马林或者4%多聚甲醛固定时间16小时到4天,4℃下进行。也可以用切片前不固定,用2.5%戊二醛二次固定10分钟。
试剂盒组成:
产品编 产品名
M071A 磷酸盐缓冲液 50ml
M071B 亚硝酸盐溶液 20ml
M071C 副品红溶液 20ml
M071D 萘酚AS-BI磷酸盐 1ml
M071E 苏木素 50ml
M071F 酒石酸钾钠 5g
 
操作步骤
  1. 石蜡切片4~5um,脱蜡至水洗;细胞爬片或者冰冻切片用80%酒精或戊二醛固定后蒸馏水水洗3次,每次3分钟。
  2. 配制六偶氮副品红溶液(亚硝酸钠溶液和副品红溶液等比例混合,即为六偶氮副品红,现配现用)
  3. 配制孵育液:取1ml六偶氮副品红加到18ml醋酸盐溶中,再加入1ml萘酚AS-BI磷酸盐溶液,再加酒石酸钾钠282mg。调pH值5.0,过滤备用;
  4. 阴性对照孵育液:取1ml六偶氮副品红加到18ml醋酸盐溶中,再加酒石酸钾钠282mg。调pH值5.0,过滤备用
  5. 切片入37℃蒸馏水水洗30秒;
  6. 入孵育液37℃孵育50-60分钟;
  7. 去离子水水洗3分钟;
  8. 入苏木素复染40秒;
  9. 自来水水洗10分钟返蓝;
  10. 甘油明胶封片。
结果分析:
体会与说明:
  1. 骨组织切片易脱片,操作过程中水洗要轻;
  2. 骨组织脱钙宜用柠檬酸脱钙或者EDTA脱钙,禁用强酸脱钙;
  3. 切片以3-4um为宜,切片过厚就会有酶扩散现象;
  4. 孵育液要新鲜配制,现用现配;pH值对染色影响比较大,pH值5.0为最佳;
  5. 37℃孵育时要防止水分蒸发,染色液干凅。
温馨提示:不可用于临床治疗。

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