货号: | COLO 829 |
生长状态: | 良好 |
年限: | 永久 |
运输方式: | 常温/快递 |
器官来源: | 见名称 |
细胞形态: | 贴壁生长 |
免疫类型: | 文献 |
物种来源: | RPMI 1640 + 2mM Glutamine + 10% FBS |
相关疾病: | 咨询客服 |
组织来源: | Human |
品系: | ATCC |
数量: | 1X10^6 cells |
规格: | T25 |
特点:细胞代数为2-3代
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,填写售后申请单并及时传真或E-mail致销售人员,审核后免费重发。
细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC以及少数国内外大学建系。代数年轻活性好,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。
>>名劲生物细胞培养问题经典分析<<
1. 液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24◦C保存。
3. 培养用液pH对细胞生长的影响
由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。 但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4. 细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?
不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。
本中心通常使用的消化液浓度为:
- 0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
- (2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
- (3)0.25% 胰蛋白酶
5.培养基在使用过程中应注意的问题:
(1). 培养基在使用前需37 oC预热或在室温平衡后再使用。
(2). 细胞培养过程中,吸取过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,防止残留在 吸管内的培养基焦化,将有害物质带入培养液中。
(3). 尽量缩短各种液体、细胞的暴露时间。
(4). 避免液体间、细胞间的交叉污染。
(5). 配制完全培养基时,配制的量最好在2周内用完为好。
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