人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价

货号：	JEB-10480
样本：	血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本
标记物：	生物素（HRP)
应用：	仅用于科研
检测方法：	酶联免疫双抗夹心法
供应商：	南京金益柏生物科技有限公司
数量：	大量
规格：	48T/96T

​​人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价简介
酶联免疫吸附测定（enzyme-linkedimmunosorbent assay简称ELISA)是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。
ELISA过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上称为包被，加待测抗原（抗体），再加相应酶标记抗体（抗原），生成抗原（抗体）-待测抗体（抗原）-酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。待测抗体（抗原）的定量与有色产生成正比。

 

人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价组成
1. 微孔板 (固相抗体)96 well
2. 标记抗体 (30倍浓缩，HRP标记抗体)0.4 ml
3. 标准品    0.5 ml × 2
4. EIA缓冲液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS)    30 ml
5. 标记抗体稀释液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS)   12 ml
6. 显色液 (TMB底物液)15 ml
7. 终止液 (1N硫酸)12 ml
8. 洗涤缓冲浓缩液 (40倍浓缩，0.05% Tween-20的磷酸缓冲液)50 ml

人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

应用
1.免疫酶染色各种细胞内成分的定位。
2.研究抗酶抗体的合成。
3.显现微量的免疫沉淀反应。
4.定量检测体液中抗原或抗体成分。

人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价操作注意事项：
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
9）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
10）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
11）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
 
 


性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%

检测范围和保存条件及有效期              
1.试剂盒保存：2-8℃
2．有效期：6个月
 
​人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。



人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价实验要点
洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：
　　（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3-4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
　　微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
（2）流水冲洗式 流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。
 
人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)南京生产商报价小问题回答
问：那我们算出来的ACH含量为什么出现负值？
答：说明个别样本的浓度很低，当浓度接近第6个点的时候  直线方程就有可能计算出负值
问：一个孔需要多少量的血清？
答：一个孔上样量10-50微升。
 
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