大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒

货号：	YH1716
样本：	细胞上清液，血浆，组织均浆，血清等
标记物：	HRP/生物素
适应物种：	大鼠
应用：	科研研究用
检测方法：	ELISA
检测限：	详看说明书
供应商：	上海依赫生物
数量：	888
规格：	48T/96T

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用    途： 用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中肌酐（Cre）的测定。
检测原理
本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中大鼠肌酐（Cre）的水平。向预先包被了大鼠肌酐（Cre）单克隆抗体的酶标孔中加入肌酐（Cre），温育；温育后，加入生物素标记的抗肌酐（Cre） 抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠肌酐（Cre）的浓度呈正相关。
试剂盒组成 
         名  称 96孔配置
12孔×8条 48孔配置
12孔×4条 备  注
 1  标准品（120ng/ml) 0.5ml 0.5ml 稀释即用型
 2   酶标包被板 1块 1块 已包被即用型
 3 标准品稀释液 3ml 3ml 即用型
 4 链霉亲和素-HRP 6ml 3ml 即用型
 5 30x倍浓缩洗涤液 20ml 20ml 蒸馏水稀释
 6 生物素标记的抗肌酐（Cre） 抗体 2ml 2ml 即用型
 7 显色剂A液 6ml 3ml 即用型
 8 显色剂B液 6ml 3ml 即用型
 9 终止液 6ml 3ml 即用型
10 说明书 1份 1份 即用型
11 封板膜 2张 2张 不可反复使用
12 密封袋 1个 1个 即用型

操作程序
1．标准品的稀释：（本试剂系统提供原倍标准品一支，用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释）按下表格执行：
 60ng/ml （5号标准品） 120μl的原倍标准品加入120μl的标准品稀释液
 30ng/ml （4号标准品） 120μl的5号标准品加入120μl的标准品稀释液
   15ng/ml （3号标准品） 120μl的4号标准品加入120μl的标准品稀释液
  7.5ng/ml （2号标准品） 120μl的3号标准品加入120μl的标准品稀释液
  3.75ng/ml （1号标准品） 120μl的2号标准品加入120μl的标准品稀释液
2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3．加样：1）空白孔：（空白对照孔不加样品，生物素标记的抗肌酐（Cre）抗体，链霉亲和素-HRP，其余各步操作相同 ；2）标准品孔:加入标准品50μl，链霉亲和素-HRP50μl（标准品中已事先整合好生物素标记抗体，故在操作时不加，只加链霉素-HRP）；3）样本反应孔：加入样本40μl，然后各加入抗肌酐（Cre）抗体10μl、链霉亲和素-HRP（空白孔除外）50μl。盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育60分钟。
4．配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。
5．洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6．显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。
7．终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟。

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