服务名称: | 石蜡组织包埋 |
规格: | 个 |
石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。此法适用范围广,制片手段完备,能将材料切成极薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成连续的片子,这是其它制片法难以达到的,因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料不能应用石蜡切片以外,一般的材料都可以用此法制片。
服务流程:
一.脱水
酒精是制片最常用的试剂,可与水互溶,酒精的脱水能力较强,对于组织会有明显的收缩作用。因此用酒精作为脱水剂时,应先从低浓度酒精开始,浓度递增,这样可以避免组织过度收缩。目前有些脱水机具备震摇功能,这样可加快脱水进程。
二. 透 明
组织脱水后,要经过浸蜡透明的过程,使石蜡渗透到组织中去,达到包埋的支持作用。由于脱水剂如酒精与石蜡不溶,因此必须使用一种与酒精和石蜡都互溶的媒剂将酒精置换掉,待酒精完全被完全取代后,组织成透明状态,即透明。
三. 浸 蜡
透明后即可将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡,石蜡逐渐浸入组织间隙,取代透明剂,这一过程叫浸蜡。石蜡的质量和熔度与切片质量密切相关,所用的石蜡有一定的熔点和硬度。
四. 包 埋
包埋,就是将浸蜡的组织块从溶解的石蜡中取出,放入充满熔融石蜡的包埋框内,使组织和包埋剂相熔并迅速冷却的过程。包埋剂凝固后,加强了组织的硬度和韧度,从而利于切片。
五. 石蜡切片
在包埋以后,就可进行切片。包埋好的石蜡块装在切片机上,进行固着整修,通常切片厚度为3-5um,注意切片速度不宜太快,防止切片机震动厉害引起切片厚薄不均匀。切好的切片须贴附于载玻片上,一般采用捞片法,但切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。
组织切片是无色透明的,必须进行染色后才能观察到各种微细结构,染色后的切片须再次经过脱水、透明、中性树脂封片,待封藏剂凝固后便成为一张成功的石蜡切片。