一、服务介绍
miRNA是内源的具有沉默效应的小RNA,科学家模拟miRNA的作用机制发明了siRNA,它是外源的具有沉默效应的小RNA。siRNA设计是决定RNAi试验成败的第一步,也是关键性的一步。RNAi是通过siRNA介导的特异性高效抑制基因表达途径,由siRNA介导识别并靶向切割同源性靶mRNA。
二、实验原理
根据基因序列设计合理的siRNA寡聚核苷酸序列。采用化学方法合成的siRNA具有操作简便、转染效率高、对细胞或者组织的毒副作用小、可大规模制备等优点,特别适用于基因靶位点不确定情况下,进行siRNA有效片段的筛选。可对siRNA末端用多种荧光标记物进行标记。标记后的siRNA可用流式细胞仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等观察到,确定转染效率,优化转染条件;标记的siRNA还可用作siRNA胞内定位及双标记实验(配合标记抗体)来追踪转染过程中导入了siRNA的细胞,将转染与靶蛋白表达的下调结合起来。
三、试验流程
1.siRNA设计。
2.siRNA合成。
四、服务说明
1. 客户提供:
客户需提供基因名称,插入片段序列、NCBI登录号等信息。
2. 公司提供:
siRNA序列及合成后的产物。
3. 试验周期:
大约3-6天。
五、质量承诺
可进行科学的序列设计,针对某靶基因设计的siRNA可保证其抑制效率达到70%左右(在转染效率大于80%的情况下),siRNA oligo均由HPLC纯化,100%除去尚未配对的单链,可提供多种修饰选择:末端修饰(FAM,Biotin等),碱基修饰(2’-OMe)。