服务名称: | CCK8细胞毒性检测 |
提供商: | 上海鸿立生物技术有限公司 |
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CCK8实验步骤
1. 将对数生长期的细胞,用0.25%胰蛋白酶消化单细胞,重悬于新鲜生长培养液中
2. 细胞2×103—2×104/well(即2×104—2×105/ml)接种于96孔培养板,100ul/well。
3. 置37℃,5% CO2培养箱中培养过夜;
4. 根据实验设计,处理96孔板中的细胞,继续置37℃,5% CO2培养箱中培养
设空白对照(仅含培养液)
设阴性对照(细胞、培养液、不含药物);
5. 药物处理时间到后,直接于每孔中加入CCK8溶液(10μl/well),37℃孵育2-4h
6. 小心吸出孔中的培养液后,再加入100μl/well的DMSO,100μl/孔
7. 室温静置至沉淀完全溶解(约10min)
8. 用酶标仪经行双波长(检测波长570nm,参考波长630nm)检测各孔OD值。
9. 结果分析
1) 取复孔平均值,各孔OD值为:(OD570nm-OD630nm)—(OD570nm-OD630nm)空白孔。
2) 细胞死亡率计算:
各孔细胞死亡率=(OD阴性对照孔—OD处理孔)/ OD阴性对照孔×100%
各孔细胞存活率= OD处理孔/ OD阴性对照孔×100%