提供商: | 上海钰森生物技术有限公司 |
服务名称: | 凋亡检测 |
规格: | 张 |
物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而对凋亡细胞或凋亡小体进行原位染色,检测细胞凋亡。
TUNEL法是在细胞和组织层次上进行生物学反应,结果直观,便于观察;可检测出极少量的凋亡细胞,灵敏度远比一般
的组织化学和生物化学测定法要高。
实验步骤:
1. 充分脱蜡和水化
2. 3%过氧化氢甲醇中浸洗10min,抑制内源性过氧化氢酶
3. 用蛋白酶K(20μg/ml溶于Tris/HCl中,pH7.4~8.0)室温孵育15min
4. PBS洗2次,每次5min,擦干样品周围的水
5. 此阶段配制TUNEL反应混合物——从试剂2中取出100μl标记溶液作为两个阴性对照;将试剂1
中取5μl+试剂2中45μl标记液中,配成50μl TUNEL反应混合物混匀(即配即用,4℃避光)
6. 标记反应:滴加50μl的TUNEL反应混合液,在湿盒中37℃孵育60min。PBS洗3次,每次5min,至此样品可
在荧光显微镜下(绿色)分析结果
7. 信号转化和分析:擦干样品周围的水分,加入50ul转化剂-POD,湿盒中37℃孵育30min。PBS洗5min*5次
8. 加入50~100μl DAB底物溶液,室温(10~25℃)孵育5 min,PBS洗5min*3次
9. 中性树胶或者甘油封片(在封片前可以复染),光镜下分析结果
我们提供:
1. 提供完成实验的玻片
2. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您
结果示意图:
服务周期:
服务内容 | 说明 | 价格∕元 | 实验周期 |
Tunel凋亡 | 提供白片 | 300元∕张 | 3个工作日 |
温馨提醒:
1. 提供新鲜的组织、固定过的组织、石蜡包埋的组织、细胞爬片、石蜡切片、冰冻切片
2. 提供具体的拍照部位