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技术简介
1)技术原理:
由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。研究表明,用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色,其DNA可染性降低。许多学者把这种DNA可染性的降低认为是凋亡细胞的标志之一。
细胞凋亡(Apoptosis):多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定,由基因控制的细胞主动性死亡过程。多细胞生物体内,某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。不同于一般的细胞坏死(cell necrosis)。
凋亡是一个系统的并普遍地程序性过程,是机体清除无用的或不想要的细胞的手段,凋亡与增殖对保持机体的动态平衡具有重要意义 。
凋亡涉及到多种疾病的发病机制,对预防和治疗这些疾病具有重要意义
过度凋亡:退化性疾病(老年性痴呆,帕金森综合症)病毒性疾病(艾滋病)等
凋亡不足:肿瘤自身免疫紊乱(类风湿性关节炎),红斑狼疮等
凋亡具有生物复杂性,是多因素、多通路参与的过程,不能根据单一指标来判断细胞凋亡,为了提高检测的“准确性”、“特异性”和“灵敏度”,必须综合各种方法的优点,发展多参数检测方法,多指标同时检测;
凋亡细胞不同时间出现的凋亡事件不同;而每个指征维持有一个时间段,所以需要在不同的时间点进行采样,把握好应用中的关键环节,并注意各种影响因子,以保证检测结果的准确性;
凋亡检测一般先定性分析,再做进一步的量化测定。鉴定方法涉及细胞体系、死亡类型、诱导剂、检测技术、手段和条件等,选择与之相关的检测方法,以提高检测的准确性和精确性;
为检测凋亡提供更加全面、准确、客观的实验依据,需充分了解各种方法的原理和特点,对检测结果做出合理的判断和分析。
2)特点及意义:
(1)用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究;
(2)应用于临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;
(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。