稳定细胞株构建
一、服务简介
构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。
慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。
研载生物制备的带puromycin抗性的慢病毒,在感染目的细胞后,可通过加入puromycin进行选择性筛选,从而获得稳定表达shRNA或者特定基因的细胞株。
二、服务优势
△先进的慢病毒包装技术
△丰富的细胞培养经验
△专业的技术服务团队
△一流的服务质量
三、服务流程
1. 客户提供:目的基因信息、目的细胞(可代购)及信息。
2. 本公司提供:目的细胞预感染、病毒载体的构建、病毒包装与纯化、滴度检测、稳定株筛选及鉴定,客户得到目的细胞稳定株及对照稳定株、完整实验报告。
3. 实验周期:60个工作日。
备注,实验服务报告内容:
△本公司构建载体的,提供载体及带有载体的菌液各一份及相关的序列信息。
△构建成功的稳定细胞株,转染后需要检测的,参考相关实验服务。
△构建稳定细胞株实验所需试剂耗材、仪器设备信息、实验方法各一份。
△其他与构建稳定细胞株技术服务相关的信息。