提供商: | 武汉盛世华康生物医药有限公司 |
服务名称: | 病理学检测 |
规格: | 不同检测-价格不等 |
是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过酶标抗体与底物反应显色,从而对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术。具有特异性强、敏感度高、定位准确的优点。
实验流程
普通组织样本(石蜡切片)
固定— 包埋—切片—免疫组化—拍照—结果分析
骨组织样本(石蜡切片)
固定—脱钙— 包埋—切片—免疫组化—拍照—结果分析
细胞样本(石蜡切片)
接爬片—固定—免疫组化—拍照—结果分析
实验结果
细胞核为深蓝色,目的蛋白为棕褐色
备注
1. 样本固定不收费
2. 结果分析指通过软件对目的蛋白的表达量进行分析
注意事项
样本
l、固定液要足量,体积一般为样本体积的10-15倍;
2、常用固定液为4%多聚甲醛,但是某些特殊组织(如眼球)需要用特殊固定液固定;
3、固定液固定的样本、蜡块、白片均可常温运输
抗体
l、注意抗体的应用范围,是否能做IHC
2、注意抗体的反应性,是否能与样本来源的种属反应
免疫荧光
免疫荧光(IF),是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过荧光标记抗体对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术。
实验结果
石蜡切片
固定— 包埋—切片—免疫组化—拍照—结果分析
冰冻切片(无需固定和包埋)
冻存(-80℃)—切片—免疫组化—拍照—结果分析
冰冻切片可使目的蛋白显色效果更好,但是组织形态容易被损坏
免疫荧光的片子除了可以用荧光显微镜拍照,还可以用激光共聚焦显微镜拍照,得到分辨率更高的图片;激光共聚焦一般用于亚细胞结构的观察,如自噬小体、细胞间纳米管道等。
注意事项
1)样本
固定液要足量,体积一般为样本体积的10-15倍
常用固定液为4%多聚甲醛,但是某些特殊组织(如眼球)需要用特殊固定液固定
固定液固定的样本、蜡块、白片均可常温运输
冰冻切片的样本要干冰运输
2)抗体
注意抗体的应用范围,是否能做IF
注意抗体的反应性,是否能与样本来源的种属反应
荧光双标的抗体需特别注意,两种目的蛋白的抗体(一抗)种属来源不能相同
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