货号: | VN302-500 |
供应商: | 微科曼得 |
数量: | 大量 |
英文名: | GelRed |
保质期: | 1年 |
保存条件: | 4度 |
规格: | 500ul |
VicGelRed核酸染料10,000×in water
产品介绍
☺ VicGelRed是一种可以替代溴化乙锭(EB)的新型荧光核酸凝胶染色试剂,其灵敏度高,毒性低,热稳定性强。采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,VicGelRed对低浓度,微量DNA表现出更高的灵敏度,尤其是小分子量DNA。在紫外光透射下DNA呈现绿色荧光,可用于琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳中的dsDNA,ssDNA及RNA染色。
产品优势
☺无毒性:VicGelRed 的大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果表明其诱变性远远小于EB。
☺灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对低浓度,微量DNA表现出更高的灵敏度。
☺稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶。
☺信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
☺操作简单:与EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
☺适用范围广:可选择样品染色法,电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
VN302-500 | VicGelRed核酸染料10,000×in water | 0.5ML |
储存条件
☺室温保存,有效期12个月。
使用说明
1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)
(1) 制胶时加入VicGelRed核酸染料(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL Vic GelRed10,000× 储液,以此比例类推)。
(2) 按照常规方法进行电泳。
注意事项:
(1) 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
(2) 由于VicGelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将VicGelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。VicGelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
(3) 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
(4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常规方法进行电泳。
(2) 用H2O将VicGelRed 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如将15μL VicGelRed 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
(3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项:
(1) 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
(2) 3×Vic GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
(3) 在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。