货号: | LM0138 |
供应商: | 上海联迈生物工程有限公司 |
数量: | 大量 |
英文名: | Normal Tyrode’s Bicarbonate Buffered Solution |
保质期: | 一年 |
保存条件: | 保存条件请参阅产品说明书 |
规格: | 250 mL |
1、组成成分:
A、1×TE缓冲液:10 mmol/L Tris.Cl;1mmol/L EDTA,pH 8.0。
B、1×TAE缓冲液:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA,pH 8.0。
C、1×TBE缓冲液:45 mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA,pH 8.0。
2、用途:
A、TE缓冲液:一般用作溶解剂或保持剂,常用于溶解DNA,能稳定储存DNA。
B、TAE缓冲液:生物学中使用最广泛的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
C、TBE缓冲液:生物学中常用的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
3、TAE和TBE缓冲液的选择:
TAE和TBE缓冲液都可以用于DNA的琼脂糖凝胶电泳,两者各有利弊,应根据实际情况选择不同的缓冲液。
TAE和TBE缓冲液的比较
TAE缓冲液:
成分:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA
优点:超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子 缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用。质量电泳大于 13kb 的片段时分离效果好,可用于回收 DNA 片段。
缺点:缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用。
TBE缓冲液:
成分:45mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA
优点:缓冲能力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于 1kb 的片段时分离效果好。
缺点:缓冲液中的硼酸成分会影响 DNA 回收效率以及后续的酶反应实验。
4、Normal Tyrode’s Bicarbonate Buffered Solution注意:
TBE浓溶液长时间存放后会形成沉淀物,出现沉淀后应予以废弃。
TMB的用途:
一种新型安全的色原试剂;TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测等领域;尤其是在临床生化检验方面,TMB作为过氧化酶的新底物,在酶免疫分析法(EIA)和酶联免疫吸附检验法(ELISA)中获得了广泛的应用;主要应用于如下项目:潜血指纹检测;唾液中酒精的快速检测;尿联试纸的配制;肝炎病毒检测;妊娠检测试验;血液和尿液中葡萄糖、血红蛋白、白蛋白的快速测定;粪便隐血试验;血液中粒细胞值的测定、类固醇、性激素的检测;酶活性的测定;抗原、抗体及遗传物质的分析、检测;生物样品的染色;水质检测(余氯、亚硝酸盐等)。
TMB的作用:
TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。
TMB的反应产物为深蓝色,Normal Tyrode’s Bicarbonate Buffered Solution利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为450nm。故TMB显色的试剂盒常用450nm/630nm检测。ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用。