货号: | HZ130634-1000 |
供应商: | 上海沪震实业有限公司 |
数量: | 大量 |
英文名: | APE 1 |
保质期: | 一年 |
保存条件: | 低温运输,-20℃保存 |
规格: | 1000U盒 |
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶产品及特点:
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶 APE1(Apurinic-ApyrimidinicEndonuclease I),也称为 HAP 1 或 Ref-1,与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5 端的磷酸二酯键,产生单链 DNA 断裂,留下3 羟基和 5 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外,据报道 APE1还具有弱的 DNA 3 二酯酶、3 到 5 外切酶和 RNase H 活性。除 DNA 修复活性外,APE 1 还能通过一种氧化还原机制,体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。作为这个功能的一部分,APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun同源二聚体、Hela 细胞AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。其反应示意图如下:
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶具体有下列特点:
1. 单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:103 。
2. 碱洗脱
3. 碱解旋
4. 改良切刻翻译
反应条件
1X Buffer [50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT (pH7.9 @ 25℃) ],37℃ 温育。
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶单位定义
1 单位指在 10 μl 总反应体系中,37℃ 条件下 1 小时,能切割 20 pmol 含一个单独 AP 位点*的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。*AP 位点的创建方法如下:37 ℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理 20pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.05 mM EDTA,200 μg/mlBSA,50% Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
热失活
65℃ 20 分钟。