货号: | HZ-0183 |
供应商: | 上海沪震实业有限公司 |
数量: | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
英文名: | PA317(小鼠成纤维细胞) |
保质期: | 无限 |
保存条件: | 常温或干冰运输 |
规格: | 50-100万个细胞数 |
PA317细胞产品概述:
PA317 小鼠成纤维细胞
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细胞名称 | PA317(小鼠成纤维细胞) |
种属 | 小鼠 |
年龄(性别) | 胚胎 |
组织来源 | 胚胎 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
背景描述 | PA317细胞源自TK-NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。PA317细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类,可能因为用于构建PA317细胞而转入的DNA丢失,能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。在含0.03mM次黄嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。选择后,PA317细胞应在HT培养基(0.03mM次黄嘌呤、0.02mM胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤,此后PA317细胞不需选择可以稳定至少1个月。 |
生长培养基 | DMEM高糖+10% FBS+1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温PA317细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
PA317细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购PA317细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
PA317细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
杂交瘤细胞;S-171-9 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;1D14A2A10 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;S-200-23 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;Jurkat-LTRGT 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;S-200-23 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;1F2 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;140-1 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;140-1 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;140-1 1×10^6 细胞数/ml
人Eppin蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞;2F2F7 人源 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;HSP70 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;G2C51A2 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;18A4 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;AVND-3C8 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;G2C51A2 1×10^6 细胞数/ml
人宫颈癌多药耐药细胞;SiHa/cDDP 人源 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;GC-5D1 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;G2C51A2 1×10^6 细胞数/ml
人宫颈癌多药耐药细胞;SiHa/VP16 人源 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;11B6 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;G2C51A2 1×10^6 细胞数/ml
人卵巢癌多药耐药细胞;SiHa/VP16 人源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠杂交瘤细胞;2F10 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;7A6A1 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;1D12-B5 1×10^6 细胞数/ml
小鼠脑膜细胞;GIBH001 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;2E8A5 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;DF4 1×10^6 细胞数/ml
猪静脉血管内皮细胞;ZYM-SVEC01 猪 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;4B14A1 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;20-G8 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;rBinlb10A5 1×10^6 细胞数/ml
杂交瘤细胞;3B1A15 1×10^6 细胞数/ml
人肾透明细胞癌细胞;HiMet-ccRCC 人源 1×10^6 细胞数/ml
小鼠骨髓多能干细胞;mMMSC 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml
人肝癌细胞;CSQT-2 人源 1×10^6 细胞数/ml
人肾透明细胞癌细胞;LoMet-ccRCC 人源 1×10^6 细胞数/ml