货号: | K12001S |
供应商: | 弘业新创抗体技术股份有限公司 |
数量: | 大量 |
保质期: | 1年 |
规格: | 10T |
活动时间:2016.12.01—2016.12.31
产品货号:K12001S
产品名称:BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品规格:10T
名额:前30名
包邮,不提供发票
备注:
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BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品说明
BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一——BCA法研制而成。实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。
干扰物质少:BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20、60、80。
试剂B 40 μl
标准蛋白(BSA) 40 μl
保存温度:室温 (标准蛋白-20 ℃保存)
有效日期:12个月
1. 配制BCA工作液:根据标准品和样品数量,按50体积试剂A,1体积试剂B配制适量BCA工作液。充分混匀。
2. 将蛋白标准品按0 μL,1 μL,2 μL,4 μL,6 μL,8 μL,10 μL加入96孔板的蛋白标准品孔中。加灭菌双蒸水补足到10 μL。取10 μL待测样品加入96孔板的待测样品孔中。每个测定要做2~3个平行。
3. 向待测样品孔和蛋白标准品孔中各加入200 μL BCA工作液(即样品与工作液的体积比为1:20),混匀。
4. 37 ℃温浴30 min。冷却至室温。
5. 酶标仪562 nm波长下测定吸光度。
6. 制作标准曲线。从标准曲线中求出样品浓度。
方法二:试管法
1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积试剂A,1体积试剂B配制适量BCA工作液,充分混匀。工作液配制的量要与测定所用的比色杯对应。每个测定要做2~3个平行。本处列举的比色体系所用的是0.5 mL的比色杯。如比色杯规格不同,体系需要放大到实验将采用的比色杯准确读数所需要的体积。
2. BSA标准品和样品的准备:样品用水或其它不干扰显色反应的缓冲液配制,使待测定的浓度位于标准曲线的线性部分。每个反应准备3个平行测定。标准曲线一般5~6个点即可。根据样品的估测浓度确定各点的具体浓度。稀释BSA时可以用水或与样品一致的溶液。如待测样品的浓度约为200 μg/mL,可按下表的次序加入BSA标准品、样品及BCA工作液。
3. 取适量体积的标准蛋白,以蛋白液:工作液=1:20的比例混匀。37 ℃温浴30 min。冷却至室温。
4. 将样品与标准品在562 nm波长下测定吸光度。
2. 检测受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响。需确保EDTA低于10 mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于
1 mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
3. 测定需酶标仪或分光光度计一台,测定波长为540-595 nm之间,562 nm最佳。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量会显著减少。
4. 试剂A和B在室温的稳定期至少1年以上。标准蛋白液需保存在-20 ℃,短期则4 ℃保存。
必拓生物(Bio-tool)品牌介绍
必拓生物(Bio-tool)是弘业新创抗体技术股份有限公司的生物试剂品牌。必拓生物(Bio-tool)紧密结合市场需求,专注于细胞培养与冻存、抗体检测与蛋白纯化、以及各类分子生物学试剂的研发与生产,目前已有近千种优质产品,应用于科研实验、体外诊断/检测试剂盒开发以及药物开发等领域,且产品品质获得广大用户的一致好评。
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